Question

【題目】圖l表示含有目的基因D的DNA片段和部分堿基序列，圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列．現(xiàn)有MspI、BamHI、MboI、SmaI四種限制性核酸內(nèi)切酶，它們識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為：C↓CGG，G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG．下列分析中正確的是（　�。�

A. 若用限制酶MspI完全切割圖1中DNA片段，會(huì)破壞2個(gè)磷酸二酯鍵

B. 若圖1用限制酶SmaI完全切割后會(huì)產(chǎn)生4種不同的DNA片段

C. 若切割圖2中的質(zhì)粒以便拼接目的基因D應(yīng)選擇限制酶BamHI和MboI

D. 導(dǎo)入含有目的基因D的重組質(zhì)粒的細(xì)菌在添加抗生素A和B的培養(yǎng)基上不能存活

Answer 1

【答案】D

【解析】

圖1中DNA片段含有2個(gè)限制酶SmaⅠ切割位點(diǎn)，若用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段，能產(chǎn)生2個(gè)平末端，產(chǎn)生三種DNA片段，基因D兩側(cè)序列為GGATCC，可被限制酶BamHⅠ切割；圖2中：質(zhì)粒含有CCGG序列、GGATCC序列和GATC序列，其中CCGG序列可被限制酶MspⅠ切割，GGATCC序列和GATC序列可被限制酶MboⅠ切割，用限制酶BamHⅠ切割破壞了抗生素A抗性基因，但沒有破環(huán)抗生素B抗性基因，因此含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌能抗抗生素B，但不能抗抗生素A。

圖1中DNA片段含有2個(gè)限制酶MspI切割位點(diǎn)，若用限制酶MspI完全切割圖1中DNA片段，會(huì)破壞4個(gè)磷酸二酯鍵，A錯(cuò)誤；圖1中DNA片段含有2個(gè)限制酶SmaⅠ切割位點(diǎn)，若用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段，能產(chǎn)生2個(gè)平末端，產(chǎn)生3種不同的DNA片段，B錯(cuò)誤；目的基因兩側(cè)是GGATCC序列，質(zhì)粒上也有該堿基序列，該序列是限制酶BamHⅠ的識(shí)別序列，若用MboI切割，則會(huì)將質(zhì)粒定的兩個(gè)標(biāo)記基因都破壞，因此要將質(zhì)粒和目的基因D連接形成重組質(zhì)粒，應(yīng)選用限制酶BamHⅠ切割，C錯(cuò)誤；用限制酶BamHⅠ切割破壞了抗生素A抗性基因，但沒有破環(huán)抗生素B抗性基因，因此含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌能抗抗生素B，不能抗抗生素A，因此在添加抗生素A和B的培養(yǎng)基上不能存活，D正確。