Question

18．欲利用基因工程技術(shù)將人胰島素基因轉(zhuǎn)入到小鼠基因組中，以期利用小鼠生產(chǎn)出人胰島素，請回答：
（1）若用逆轉(zhuǎn)錄的方法獲得人胰島素基因，則需要從人體相應(yīng)的胰島β細(xì)胞細(xì)胞中提取mRNA，獲得的人胰島素基因經(jīng)過相應(yīng)處理后，再利用顯微注射技術(shù)將其注入到受體細(xì)胞中，下列最不適合作為受體細(xì)胞的是B（A．受精卵B．胚胎干細(xì)胞C．第一次卵裂形成的細(xì)胞D．第三次卵裂形成的細(xì)胞）
（2）為獲得更多的受體細(xì)胞，可先對成年雌鼠注射激素進(jìn)行超數(shù)排卵處理，將獲得的卵母細(xì)胞培養(yǎng)成熟，與經(jīng)獲能處理的精子結(jié)合形成受精卵后再進(jìn)行后期操作．
（3）導(dǎo)入胰島素基因的受體細(xì)胞還需借助胚胎體外培養(yǎng)、胚胎移植等胚胎工程技術(shù)才能成為轉(zhuǎn)基因小鼠．

Answer 1

分析 1、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、體外受精主要包括：卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精．
（1）卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)
①主要方法是：用促性腺激素處理，使其超數(shù)排卵，然后，從輸卵管中沖取卵子．
 ②第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細(xì)胞或直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細(xì)胞．
（2）精子的采集和獲能
①收集精子的方法：假陰道法、手握法和電刺激法．
②對精子進(jìn)行獲能處理：包括培養(yǎng)法和化學(xué)誘導(dǎo)法．
（3）受精：在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫�溶液中完成受精過程．

解答 解：（1）胰島素基因只在胰島β細(xì)胞中才表達(dá)，因此若用逆轉(zhuǎn)錄的方法獲得人胰島素基因，則需要從人體相應(yīng)的胰島β細(xì)胞中提取mRNA，獲得的人胰島素基因經(jīng)過相應(yīng)處理后，再利用顯微注射技術(shù)將其注入到受體細(xì)胞中；受精卵的全能性最高，第一次卵裂形成的細(xì)胞和第三次卵裂形成的細(xì)胞都屬于全能細(xì)胞，因此相比較而言最不適合作為受體細(xì)胞的是胚胎干細(xì)胞．
（2）為獲得更多的受體細(xì)胞，可先對成年雌鼠注射激素進(jìn)行超數(shù)排卵處理，將獲得的卵母細(xì)胞培養(yǎng)成熟，與經(jīng)獲能處理的精子結(jié)合形成受精卵后再進(jìn)行后期操作．
（3）導(dǎo)入胰島素基因的受體細(xì)胞還需借助胚胎體外培養(yǎng)、胚胎移植等胚胎工程技術(shù)才能成為轉(zhuǎn)基因小鼠．
故答案為：
（1）胰島β細(xì)胞     B    
（2）超數(shù)排卵     獲能   
（3）胚胎體外培養(yǎng)     胚胎移植

點(diǎn)評 本題考查基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)；識記胚胎工程的相關(guān)技術(shù)及其應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．