Question

【題目】下圖表示利用PCR技術檢測受檢人是否攜帶HIV（屬逆轉錄病毒）的示意圖。請回答：

（1）組成HIV的遺傳物質的單體是________。HIV攜帶者T細胞的核DNA能指導合成HIV的蛋白質，原因是__________。

（2）設計圖中所示的引物時，應滿足的要求是：

①引物自身不能存在互補配對序列，原因是避免引物自身通過折疊形成雙鏈區(qū)；

②引物之間不能存在_______________，原因是避免兩引物結合成雙鏈；

③_______________________________。

（3）在PCR反應體系中，除具備緩沖液、模板DNA分子和引物外，還應有______（選填編號）。

①Taq酶， ②dNTP（dCTP、dATP、dGTP和dTTP）， ③四種堿基， ④ATP， ⑤氨基酸。

（4）利用基因工程方法制備HIV的某蛋白（目的蛋白）時，需使用DNA連接酶來構建基因表達載體。其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是______DNA連接酶，DNA連接酶催化形成的化學鍵是______________。基因表達載體必須有RNA聚合酶識別和結合的部位，該部位稱為__________。

Answer 1

【答案】 核糖核苷酸 HIV 的RNA 逆轉錄出的DNA 能整合到T 細胞的核DNA 中，且能被正常轉錄翻譯 互補配對序列 引物只能和HIV 逆轉錄形成的DNA 序列互補配對 ①② T4 磷酸二酯鍵 啟動子

【解析】本題考查基因工程相關知識，解題要點是識記基因工程的原理、基本工具和操作程序。

（1）HIV（屬逆轉錄病毒）的遺傳物質是RNA，組成單體是核糖核苷酸；由于HIV 的RNA經逆轉錄出的DNA 能整合到T 細胞的核DNA 中，且能被正常表達，故HIV攜帶者T細胞的核DNA能指導合成HIV的蛋白質。

（2）為避免兩引物結合成雙鏈，引物之間不能存在互補配對序列；由于該PCR過程的目的是檢測被測者細胞中是否有HIV逆轉錄成的DNA，故引物只能和HIV 逆轉錄形成的DNA 序列互補配對。

（3）PCR即體外DNA擴增，原理是DNA復制，所以在PCR反應體系中，除具備緩沖液、模板DNA分子和引物外，還要4種dNTP混合物和Taq DNA聚合酶。

（4）T4 DNA連接酶既能連接黏性末端又能連接平末端；DNA連接酶催化形成的化學鍵是磷酸二酯鍵；DNA上被RNA聚合酶識別和結合的部位稱為啟動子。

[點睛]：本題解題關鍵是：1.對PCR技術的原理和反應過程的識記，注意設計引物應遵循的原則：①引物長度；②引物擴增跨度；③引物堿基；④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補；⑤引物的特異性等； 2.分析圖示，提取信息，結合教材用規(guī)范性的語言答題。