Question

【題目】某生物興趣小組試圖探究牛和山羊的瘤胃中的微生物對尿素是否有分解作用，設(shè)計了以下實驗，并成功篩選到能降解尿素的細(xì)菌（目的菌）．培養(yǎng)基成分如表所示，實驗步驟如圖所示．請分析回答問題：

KH2PO4	1.4g
Na2HPO4	2.1g
MgSO47H2O	0.2g
葡萄糖	10g
尿素	1g
瓊脂	15g
溶解后自來水定容到1000mL

（1）從培養(yǎng)基的物理性質(zhì)分析，該培養(yǎng)基屬于；從培養(yǎng)基的用途分析，該培養(yǎng)基屬于 ．
（2）在實驗過程中：①培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿；②玻棒、試管、錐形瓶、吸管；③瘤胃中液體；④涂布器．其中需要滅菌是（填序號）．
（3）分離分解尿素的細(xì)菌實驗時，甲同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個菌落．甲同學(xué)堅信自己的實驗結(jié)果是準(zhǔn)確的，則甲同學(xué)的實驗結(jié)果產(chǎn)生差異的原因最可能是（填序號） ①取樣不同 ②培養(yǎng)基污染 ③操作失誤 ④沒有設(shè)置對照
（4）為確定實驗中微生物屬于尿素分解菌，可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若菌落變成色，說明瘤胃中的微生物能分解酵素．理由是 ．
（5）為進(jìn)一步確定取自瘤胃中液體的適當(dāng)稀釋倍數(shù)，將接種的培養(yǎng)皿放置在37°C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h～48h，觀察并統(tǒng)計具有紅色環(huán)帶的菌落數(shù)，結(jié)果如表，其中倍的稀釋比較合適．

稀釋倍數(shù)	103	104	105	106	107
菌落數(shù)	＞500	367	248	36	18

（6）若要在右圖實驗中對瘤胃中的目的菌進(jìn)行計數(shù)，應(yīng)采用什么計數(shù)法？ ， 該方法的缺點是容易導(dǎo)致結(jié)果偏小，請寫出結(jié)果偏小的原因 ． （寫出一項即可）

Answer 1

【答案】
（1）固體培養(yǎng)基；選擇培養(yǎng)基
（2）①、②、④
（3）①
（4）紅；細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨,PH增高,使酚紅指示劑變紅
（5）106或105
（6）活菌計數(shù)法（或間接計數(shù)法）；兩個或多個細(xì)胞可能共同形成一個菌落,導(dǎo)致結(jié)果偏小（一些細(xì)菌在培養(yǎng)過程中死亡后,不能形成菌落,導(dǎo)致結(jié)果偏�。�
【解析】解：（1）分析表格，培養(yǎng)基成分中含有瓊脂作為凝固劑，因此從培養(yǎng)基的物理性質(zhì)分析，該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基；并且培養(yǎng)基中加入尿素為唯一氮源，因此從培養(yǎng)基的用途分析，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．（2）在實驗過程中，①培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿，②玻棒、試管、錐形瓶、吸管，④涂布器需要滅菌處理，而③瘤胃中液體如果經(jīng)過滅菌將使其中的微生物全部死亡．（3）根據(jù)題意可知，甲同學(xué)堅信自己的實驗結(jié)果是準(zhǔn)確的，則甲同學(xué)的實驗結(jié)果產(chǎn)生差異的原因最可能是取樣不同．（4）細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，PH增高，使酚紅指示劑變紅，因此以通過在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，檢測培養(yǎng)基pH的變化來判斷尿素是否被分解．（5）觀察并統(tǒng)計菌落數(shù)應(yīng)選30﹣300之間的培養(yǎng)皿進(jìn)行統(tǒng)計，故應(yīng)選106或105倍的稀釋比較合適．（6）若要在右圖實驗中對瘤胃中的目的菌進(jìn)行計數(shù)，應(yīng)采用活菌計數(shù)法（或間接計數(shù)法），兩個或多個細(xì)胞可能共同形成一個菌落，導(dǎo)致結(jié)果偏�。�

所以答案是：（1）固體培養(yǎng)基 選擇培養(yǎng)基 （2）①、②、④（3）①（4）紅 細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，PH增高，使酚紅指示劑變紅（5）106或105（6）活菌計數(shù)法（或間接計數(shù)法） 兩個或多個細(xì)胞可能共同形成一個菌落，導(dǎo)致結(jié)果偏�。ㄒ恍┘�(xì)菌在培養(yǎng)過程中死亡后，不能形成菌落，導(dǎo)致結(jié)果偏小）