Question

15．I洗衣機內部的環(huán)境非常潮濕，洗衣機使用時間越長，內部滋生微生物的機會就越大．看似干凈的洗農機，其內部隱藏著一個健康的隱形殺手．某生物興趣小組的同學，利用內桶背面的污垢進行了相關實驗．
（1）培養(yǎng)洗衣機內部微生物的培養(yǎng)基中一般含有水、無機鹽、碳源和氮源．
（2）鑒定洗衣L污垢是否有菌落時要制備固體培養(yǎng)基，在制備完畢后要進行到平板操作，將平板倒置的目的是防止培養(yǎng)皿蓋上凝結的水珠落入培養(yǎng)皿造成污染，還可防止培養(yǎng)基表面的水分揮發(fā)．
Ⅱ我國生活飲用水本質標準中規(guī)定生活飲用水中細菌總數(shù)不得大于100個/mL，總大腸桿菌菌群不得大于3個/L．
（1）檢驗大腸稈菌的含量時，通常將水樣進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋濃度的  水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量，這種方法稱為稀釋涂布平板法．
（2）如分別取0．lmL已稀釋10²倍的水樣分別涂布到四個瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培  養(yǎng)，培養(yǎng)基記錄到大腸桿菌的菌落數(shù)分別為161、155、158、170，則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為1.61×10⁸．
（3）用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時需要（需要/不需要）設置對照組，原因是需要判斷培養(yǎng)基是否被污染．
（4）純化大腸桿菌時使用的培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌，不可（可/不可）用加入抗生素的方法防止雜菌感染．

Answer 1

分析 微生物的營養(yǎng)物質主要有碳源、氮源、水和無機鹽等，有的微生物培養(yǎng)基中還需要添加生長因子等物質．
稀釋平板計數(shù)是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個菌落，即是由一個單細胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征設計的計數(shù)方法，即一個菌落代表一個單細胞．
計數(shù)時，首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細胞分散開，使成單個細胞存在（否則一個菌落就不只是代表一個細胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內．經培養(yǎng)后，由單個細胞生長繁殖形成菌落，統(tǒng)計菌落數(shù)目，即可計算出樣品中的含菌數(shù)．此法所計算的菌數(shù)是培養(yǎng)基上長出來的菌落數(shù)，故又稱活菌計數(shù)．

解答 解：Ⅰ（1）培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中一般含有水、無機鹽、碳源和氮源等．
（2）培養(yǎng)基倒置培養(yǎng)是為了防止水珠落入培養(yǎng)皿造成污染，可防止培養(yǎng)基表面的水分揮發(fā)，造成污染．
Ⅱ（1）對微生物的分離常用稀釋涂布平板法和平板劃線法進行接種，但稀釋涂布平板法適用于微生物的計數(shù)．
（2）每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為：（161+155+158+170）÷4×1000×10³=1.61×10⁸個．
（3）由于需要判斷培養(yǎng)基是否被污染，所以用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時需要設置對照組．
（4）純化大腸桿菌時使用的培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法滅菌，不可用加入抗生素的方法防止雜菌感染．
故答案為：
Ⅰ（1）水、無機鹽、碳源和氮源
（2）防止培養(yǎng)皿蓋上凝結的水珠落入培養(yǎng)皿造成污染，還可防止培養(yǎng)基表面的水分揮發(fā)
Ⅱ（1）稀釋涂布平板法
（2）1.61×10⁸
（3）需要  需要判斷培養(yǎng)基是否被污染
（4）高壓蒸汽    不可

點評 本題旨在考查微生物的分離和培養(yǎng)、某種微生物數(shù)量的測定和培養(yǎng)基對微生物的選擇利用，意在考查具備驗證簡單生物學事實的能力，并能對實驗現(xiàn)象和結果進行解釋、分析和處理，具有對一些生物學問題進行初步探究的能力．