Question

9．根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí)，回答下列問(wèn)題：
（1）限制性內(nèi)切酶切割DNA分子后產(chǎn)生的片段，其末端類型有黏性末端和平末端．
（2）質(zhì)粒運(yùn)載體用EcoRⅠ切割后產(chǎn)生的片段如圖：為使運(yùn)載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，還可用另一種限制性內(nèi)切酶切割，該酶必須具有的特點(diǎn)是切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRI切割產(chǎn)生的相同．
（3）按其來(lái)源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩項(xiàng)，即E•coliDNA連接酶和T₄DNA連接酶．
（4）反轉(zhuǎn)錄作用的模板是mRNA（或RNA）．
（5）若用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，原因是未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力極弱．

Answer 1

分析 基因工程的工具：
（1）限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．
（2）DNA連接酶：DNA連接酶分為兩類：E．coliDNA連接酶和T₄DNA連接酶，連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵．
（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒．

解答 解：（1）經(jīng)限制性核酸內(nèi)切酶切割后能形成兩種類型的末端，即平末端和黏性末端．
（2）為了便于相連，兩種不同限制酶切割之后所產(chǎn)生的黏性末端必須相同．
（3）DNA連接酶分為兩類：E．coliDNA連接酶和T₄DNA連接酶．這二者都能連接黏性末端，此外T₄DNA連接酶還可以連接平末端，但連接平末端時(shí)的效率比較低．
（4）反轉(zhuǎn)錄是以mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄先合成單鏈DNA，再合成雙鏈DNA．
（5）當(dāng)受體細(xì)胞是細(xì)菌時(shí)，為了增大導(dǎo)入的成功率，常用Ca²⁺處理，得到感受態(tài)細(xì)胞，此時(shí)細(xì)胞壁和細(xì)胞膜的通透性增大，容易吸收重組質(zhì)粒．而未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力極弱．
故答案為：
（1）黏性末端   平末端
（2）切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRI切割產(chǎn)生的相同
（3）T₄
（4）mRNA（或RNA）  
（5）吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力極弱

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，重點(diǎn)考查基因工程的工具，只要考生識(shí)記基因工程三種工具的相關(guān)知識(shí)即可，屬于考綱識(shí)記層次的考查，這需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過(guò)程中構(gòu)建相關(guān)知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)．