Question

繼哺乳動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后，膀胱生物反應(yīng)器的研究也取得了一定進(jìn)展．最近，科學(xué)家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長(zhǎng)激素并分泌到尿液中．請(qǐng)回答：
（1）將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)�入小鼠受體細(xì)胞，常用方法是

 

．
（2）在基因工程中，將目的基因與運(yùn)載體結(jié)合時(shí)必須用

 

酶．進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移時(shí)，通常要將外源基因轉(zhuǎn)入

 

中，原因是

 

．
（3）通常采用

 

技術(shù)檢測(cè)外源基因是否插入了小鼠的基因組．
（4）在研制膀胱生物反應(yīng)器時(shí)，應(yīng)使外源基因在小鼠的

 

細(xì)胞中特異表達(dá)．
（5）為使外源基因在后代長(zhǎng)期保持，可將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞的

 

細(xì)胞中構(gòu)成重組細(xì)胞，使其發(fā)育成與供體具有相同性狀的個(gè)體．該技術(shù)稱為

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)

專題：

分析：基因工程技術(shù)的基本步驟：
1、目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
3、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
4、目的基因的檢測(cè)與鑒定：（1）分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．（2）個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答： 解：（1）將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法人．
（2）在基因工程中，構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需先用同種限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運(yùn)載體，還需要用DNA連接酶將目的基因與運(yùn)載體結(jié)合形成重組DNA．由于受精卵（或早期胚胎細(xì)胞）具有全能性，可使外源基因在相應(yīng)組織細(xì)胞表達(dá)，因此進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移時(shí)，通常要將外源基因轉(zhuǎn)入受精卵（或早期胚胎）中．
（3）檢測(cè)目的基因是否插入了小鼠的基因組通常采用DNA分子雜交技術(shù)．
（4）在研制膀胱生物反應(yīng)器時(shí)，應(yīng)在目的基因前加膀胱組織特異性表達(dá)的啟動(dòng)子，使外源基因在小鼠的膀胱上皮細(xì)胞中特異表達(dá)．
（5）為使外源基因在后代長(zhǎng)期保持，可將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞的細(xì)胞核轉(zhuǎn)入去核的卵細(xì)胞中構(gòu)成重組細(xì)胞，使其發(fā)育成與供體具有相同性狀的個(gè)體，該技術(shù)稱為核移植（或克�。�．
故答案為：
（1）顯微注射      
（2）同種限制酶和DNA連接酶  受精卵（或早期胚胎）    受精卵（或早期胚胎細(xì)胞）具有全能性，可使外源基因在相應(yīng)組織細(xì)胞表達(dá)
（3）DNA分子雜交（核酸探針）      
（4）膀胱上皮
（5）細(xì)胞核轉(zhuǎn)入去核的卵    核移植（或克�。�

點(diǎn)評(píng)：本題以膀胱生物反應(yīng)器的制備為題材，考查基因工程和核移植的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的具體步驟及相關(guān)注意事項(xiàng)；識(shí)記核移植的概念，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．