Question

【題目】萌發(fā)的小麥種子中主要有α－淀粉酶(在pH3.6以下迅速失活，但耐熱)和β－淀粉酶(不耐熱，70℃條件下15min后就失活，但耐酸)。請根據(jù)以下實驗過程回答相關(guān)問題。
[實驗目的]測定40℃條件下α－淀粉酶的催化效率。
[實驗材料]萌發(fā)3天的小麥種子。
[主要器材]麥芽糖標準溶液、5%淀粉溶液、斐林試劑、蒸餾水、恒溫水浴鍋、試管等。
[實驗步驟]
（1）步驟一：制備不同濃度麥芽糖溶液，與斐林試劑生成標準顏色。取7支潔凈試管編號，按下表中所示加入試劑，再將試管置于60℃水浴中加熱2min，取出后按編號排好。

試劑	試管
	1	2	3	4	5	6	7
麥芽糖標準溶液(mL)	0	0.2	0.6	1.0	1.4	1.6	2.0
蒸餾水(mL)	X	1.8	Y	1.0	Z	0.4	0
斐林試劑(mL)	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0

表中X、Y、Z代表的數(shù)值依次是。
（2）步驟二：以萌發(fā)的小麥種子制取淀粉酶溶液，將裝有淀粉酶溶液的試管置于 ， 以獲得α－淀粉酶溶液。
（3）步驟三：取A、B、C、D四組試管分別作以下處理：

試 管	A1	A2	A3	B1	B2	B3	C	D
5%淀粉溶液(mL)	1	1	1
α－淀粉酶溶液(mL)				1	1	1		1
蒸餾水(mL)							1
40℃水浴鍋中保溫(min)	10	10	10	10	10	10	10	10

步驟四：將A1和B1試管中溶液加入到E1試管中，A2和B2溶液加入到E2試管中，A3和B3溶液加入到E3試管中，C、D試管中的溶液均加入到F試管中，立即將E1、E2、E3、F試管在40℃水浴鍋中保溫一段時間。然后分別加入 ， 并經(jīng)過后，觀察顏色變化。
（4）[結(jié)果分析]用法獲得試管中麥芽糖濃度：將E1、E2、E3試管中的顏色與試管進行比較得出結(jié)果；計算出α－淀粉酶催化效率的。
（5）[討論]①實驗中F試管所起的具體作用是排除對實驗結(jié)果的干擾，從而對結(jié)果進行校正。②若要測定β－淀粉酶的活性，則需要對步驟二進行改變，具體的操作是將淀粉酶溶液處理一段時間，從而獲得β－淀粉酶。

Answer 1

【答案】
（1）2.0、1.4、0.6
（2）70℃水浴鍋中15min(或答70℃條件下、時間長于15min)，取出后（迅速）冷卻
（3）2mL斐林試劑；60℃水浴中加熱2min
（4）比色；1-7號（以及F）；平均值
（5）（α-）淀粉酶溶液中還原糖；置于pH低于3.6溶液中
【解析】（1）步驟一：由表中數(shù)據(jù)可知，根據(jù)對照原則，蒸餾水+麥芽糖標準溶液=2mL，所以表中X為2、Y為1.4、Z為0.6。（2）步驟二：根據(jù)題意，用萌發(fā)的小麥種子制取α-淀粉酶溶液，但萌發(fā)的小麥種子也含有β-淀粉酶，α－淀粉酶在pH3.6以下迅速失活，但耐熱，而β－淀粉酶不耐熱，70℃條件下15min后就失活，但耐酸，因此以萌發(fā)的小麥種子制取淀粉酶溶液，置于70℃水浴鍋中15min，取出后（迅速）冷卻，就可以得到α－淀粉酶溶液。（3）步驟四：反應結(jié)束后，需用斐林試劑進行鑒定，使用斐林試劑時需要在60℃水浴中加熱3min后，再觀察顏色變化。（4）結(jié)果分析：最后將E1、E2、E3試管中的顏色與1-7號試管進行比較，獲得該試管中麥芽糖濃度，并計算出各組a-淀粉酶的催化效率的平均值，這種方法為比色法。（5）討論：實驗中F試管時對照組，作用是排除淀粉酶溶液中還原糖對實驗結(jié)果的干擾從而對結(jié)果進行校對；若要測定β-淀粉酶的活性，則需將制備的淀粉酶溶液置于pH低于3.6溶液中，獲得β-淀粉酶溶液。
【考點精析】本題主要考查了探究影響酶活性的因素的相關(guān)知識點，需要掌握pH: 在最適pH下，酶的活性最高，pH值偏高或偏低酶的活性都會明顯降低；溫度: 在最適溫度下酶的活性最高，溫度偏高或偏低，酶的活性都會明顯降低；酶的濃度、底物濃度、產(chǎn)物濃度的影響才能正確解答此題．