Question

【題目】某個實驗小組對微生物的培養(yǎng)和五種香辛料提取的精油（編號為A、B、C、D、E）的抑菌能力進(jìn)行了研究。首先制備了直徑相同的圓濾紙片若干，滅菌后分別放入各組精油中浸泡處理。然后取各種待測菌懸液0．15 mL分別在相應(yīng)的固體培養(yǎng)基上均勻涂布，制成含菌平板。再取浸泡過精油的濾紙片貼在含菌平板上，每個培養(yǎng)皿貼浸過同一種精油的濾紙3片，放培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一定時間。測定抑菌圈直徑，結(jié)果取三次重復(fù)實驗的平均值，其數(shù)據(jù)如表所示（單位：mm）。請分析回答：

（1）從香辛料植物中提取精油的方法有：__________。

（2）在微生物培養(yǎng)過程中，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止_________，不同微生物培養(yǎng)時pH的要求往往不同，培養(yǎng)大腸桿菌和白葡萄球菌時需將培養(yǎng)基pH調(diào)至___。

（3）實驗使用涂布器接種，接種前涂布器的滅菌方法為_________，接種后將培養(yǎng)基放置在培養(yǎng)箱中_____（填“需要”或者“不需要”）振蕩培養(yǎng)。

精油種類 抑菌圈直徑（mm） 菌種	A	B	C	D	E
大腸桿菌	21．1	26．0	15．1	24．0	23．2
白葡萄球菌	14．7	22．0	19．1	12．0	29．1
黑曲霉	24．6	33．0	26．0	24．5	49．6
青霉	25．3	38．2	24．3	25．1	42．8

?

（4）培養(yǎng)一定的時間后，可根據(jù)不同微生物在固體培養(yǎng)基上形成的菌落的________（答出2項即可）等特征區(qū)分不同的微生物。

（5）根據(jù)實驗結(jié)果，不同精油對不同種類的微生物殺傷作用不同，其中精油______對真菌的殺傷作用最強(qiáng)。該實驗還缺少一組空白對照，請嘗試補(bǔ)充：______________。

Answer 1

【答案】蒸餾、壓榨和萃取??? 外來雜菌的入侵（雜菌污染）??? 中性或微堿性??? 沾取酒精，引燃??? 不需要??? 形狀、大小、隆起程度、顏色??? E??? 增加一組未用精油浸泡的濾紙片進(jìn)行實驗???

【解析】

1、植物芳香油的提取方法：蒸餾法、萃取法和壓榨法等。?
（1）蒸餾法：芳香油具有揮發(fā)性。把含有芳香油的花、葉等放入水中加熱，水蒸氣能將揮發(fā)性較強(qiáng)的芳香油攜帶出來，形成油水混合物；冷卻后，油水混合物又會重新分成油層和水層，除去水層便得到芳香油，這種提取方法叫蒸餾法。根據(jù)蒸餾過程中原料放置的位置的標(biāo)準(zhǔn)，將水蒸氣蒸餾法劃分為水中蒸餾、水上蒸餾和水氣蒸餾。?
（2）萃取法：這種方法需要將新鮮的香花等植物材料浸泡在乙醚、石油醚等低沸點(diǎn)的有機(jī)溶劑中，使芳香油充分溶解，然后蒸去低沸點(diǎn)的溶劑，剩下的就是芳香油。?
（3）壓榨法：在橘子、檸檬、甜橙等植物的果皮中，芳香油的含量較多，可以用機(jī)械壓力直接榨出，這種提取方法叫壓榨法。

2、在探究精油對微生物的抑菌能力時，實驗用的培養(yǎng)基中需要加入瓊脂，使液體培養(yǎng)基轉(zhuǎn)化成固體培養(yǎng)基，方便測量抑菌圈直徑。判斷精油的抑菌能力大小的指標(biāo)是抑菌圈直徑大小，抑菌圈直徑大則說明精油的殺傷作用大。

（1）從香辛料植物中提取精油的方法有蒸餾、壓榨和萃取。

（2）在微生物培養(yǎng)過程中，防止外來雜菌的入侵是獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵，不同微生物培養(yǎng)時pH的要求往往不同，培養(yǎng)大腸桿菌和白葡萄球菌時需將培養(yǎng)基pH調(diào)至中性或微堿性。
（3）涂布器的滅菌方法為將涂布器沾取酒精，在酒精燈的外焰引燃，待涂布器上的酒精燃燒完冷卻后進(jìn)行涂布操作，接種后將培養(yǎng)基放置在培養(yǎng)箱中，由于是固體培養(yǎng)基因此不需要振蕩培養(yǎng)。
（4）菌落是鑒定不同微生物的主要特征，菌落的特征包括菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等方面，可根據(jù)不同微生物在固體培養(yǎng)基上形成的菌落的特征區(qū)分不同的微生物。
（5）根據(jù)實驗結(jié)果，不同精油對不同種類的微生物殺傷作用不同。分析表中數(shù)據(jù)可知，精油E對黑曲霉和青霉形成的抑菌圈大于其它種類的精油，所以精油E對真菌的殺傷作用最強(qiáng)。該實驗還缺少一組空白對照，由于該實驗的目的是研究五種香辛料提取的精油的抑菌能力，空白對照補(bǔ)充如下：增加一組未用精油浸泡的濾紙片進(jìn)行的實驗，其它條件均相同。