Question

生物技術(shù)的廣泛應(yīng)用，給社會(huì)帶來(lái)了較大的經(jīng)濟(jì)效益，受到廣泛重視．請(qǐng)回答下列與生物技術(shù)實(shí)踐有關(guān)的問(wèn)題：
（1）科學(xué)家發(fā)現(xiàn)家蠅體內(nèi)存在一種抗菌活性蛋白．這種蛋白質(zhì)具有極強(qiáng)的抗菌能力，受到研究者重視．分離該抗菌蛋白可用電泳法，其原理是蛋白質(zhì)分子的

 

、分子大小及形狀不同，其在電場(chǎng)中的

 

不同．
（2）Taq耐熱菌的發(fā)現(xiàn)和分離為基因工程的發(fā)展作出了突出貢獻(xiàn)．分離Taq耐熱菌所需要的特殊培養(yǎng)條件是

 

，從Taq耐熱菌中分離出的Taq酶應(yīng)用于PCR技術(shù)中引物延伸所需的

 

酶．在生物體內(nèi)進(jìn)行DNA復(fù)制所必需fIPCR技術(shù)中不需要的酶是

 

．
（3）為了節(jié)約成本可將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)．科研人員采用戊二醛使酶相互連接，該種固定方法為

 

；而細(xì)胞多采用

 

法進(jìn)行固定．
（4）在固定化酵母細(xì)胞時(shí)，將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫，加入

 

，充分?jǐn)囀职胧蛊浠旌暇鶆�，再轉(zhuǎn)移到注射器中，以制取凝膠珠．

Answer 1

考點(diǎn)：PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用,制備和應(yīng)用固相化酶

專題：

分析：電泳法利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)和凈電量的差異、分子本身大小及形狀不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離．PCR技術(shù)中，高溫可使氫鍵斷裂，不需要解旋酶，但需要Taq酶催化引物延伸．固定化酵母細(xì)胞，常用包埋法，過(guò)程為酵母細(xì)胞活化、配置氯化鈣溶液、配置海藻酸鈉溶液、
將酵母細(xì)胞溶液和海藻酸鈉溶液混合、固定化酵母細(xì)胞．

解答： 解：（1）電泳法利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)和凈電量的差異、分子本身大小及形狀不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離．
（2）Taq酶能耐高溫，而普通的酶在高溫下會(huì)失活，所以分離Taq耐熱菌需要高溫條件．從Taq耐熱菌中分離出的Taq酶應(yīng)用于PCR技術(shù)中，用于引物延伸，因?yàn)橐�物延伸需要DNA聚合酶．在生物體內(nèi)，進(jìn)行DNA復(fù)制需要解旋酶將DNA雙螺旋打開(kāi)，而在PCR技術(shù)中，高溫可使氫鍵斷裂，不需要解旋酶．
（3）采用戊二醛使酶相互連接的方法為交聯(lián)法（化學(xué)結(jié)合法）；而細(xì)胞體積較大，多采用包埋法進(jìn)行固定．
（4）在固定化酵母細(xì)胞時(shí)，將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫，加入活化的酵母細(xì)胞，充分?jǐn)嚢枋蛊浠旌暇鶆�，再轉(zhuǎn)移到注射器中，以制取凝膠珠．
故答案：（1）所帶電荷性質(zhì)和凈電量的差異  泳動(dòng)（遷移）速度   
（2）高溫  DNA聚合  解旋酶
（3）交聯(lián)法（化學(xué)結(jié)合法）  包埋   
（4）活化的酵母細(xì)胞

點(diǎn)評(píng)：本題考查生物大分子的分離、PCR技術(shù)、固定化技術(shù)及固定化酵母細(xì)胞的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)的能力．