Question

【題目】回答下列（一）、（二）小題：

（一）鎘是工業(yè)廢水中常見的污染物，對人休的傷害極大，我國環(huán)保法列為一類污染物。一些微牛物可以分泌多聚糖，糖蛋白，脂多糖，可溶性氨基酸等胞外聚介物質(zhì)，這些聚合物具有絡合或沉淀金屬離子，從而起到凈化工業(yè)廢水中重金屬鹽的功能。某同學準備依據(jù)下圖操作步驟，從處理廢水的活性污泥中分離篩選鎘降解高效菌株。請回答下列問題：

（1）_________是消除污染雜菌的通用方法，也是用于篩選高表達量菌株的最簡便方法之一。

（2）鎘降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨、鎘、葡萄糖、水等物質(zhì)，則其在進行滅菌時應控制壓力在______。分離時應取不同濃度的稀釋液_________ml涂也到平板上。

（3）下圖為平板劃線法分離純化細菌，整個實驗過程需要將接種環(huán)灼燒滅菌_____________次。

A.2 B.3 C.4 D.5

（4）采用光電比色測定法檢測降解后的廢水中鎘留量。在制備標準曲線實驗過程，下表中15號比色管的鎘濃度應分別為_________。

管號	1	2	3	4	5	6
鎘濃度（mg/mL)						1

最后分別以_________為橫、縱坐標繪制曲線。

（二）生物技術己經(jīng)滲入到了我們生活的方方面面。請回答下列有關動物細胞培養(yǎng)的相關問題：

（1）動物細胞培養(yǎng)的原理是_________，需要將培養(yǎng)瓶放入_________培養(yǎng)。

（2）培養(yǎng)過程中需要用胰蛋白酶消化組織中的_________。

（3）傳代培養(yǎng)得到的細朐系往往具有_________核型。關于細胞系和細胞株下列說法錯誤的是（___）

A.原代培養(yǎng)得到的細胞也可以是細胞系

B.細胞株是特殊的細胞系

C.連續(xù)細胞系都獲得了不死性

D.連續(xù)細胞系不一定都發(fā)生了轉(zhuǎn)化

（4）細胞克隆又稱為克隆培養(yǎng)法，它的最主要用途之一就是從普通細胞系中分離出_________突變會田胞系。

Answer 1

【答案】 單菌落的分離 500g/cm2 0.1 C 0、0.2、0.4、0.6、0.8 鎘濃度、光密度值 細胞增值 C02培養(yǎng)箱 膠原纖維 異倍體 D 缺乏特殊基因

【解析】試題分析：微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．對異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時并不是起單一方面的作用。微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

（一）（1）單菌落的分離是消除污染雜菌的通用方法。

（2）鎘降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨、鎘、葡萄糖、水等物質(zhì)，則其在進行滅菌時應控制壓力在500g/cm2。分離時應取不同濃度的稀釋液0.1ml涂到平板上。

（3）根據(jù)圖中平板劃線法中劃線的方向和起始端可知，整個實驗過程中劃了三次線，而每一次劃線前后都需要滅菌，所以一共需要滅菌4次，故選C。

（4）以鎘濃度為自變量，光密度值為因變量繪制曲線圖，其中表格中各組的鎘濃度應該等濃度梯度，為0、0.2、0.4、0.6、0.8。

（二）（1）動物細胞培養(yǎng)的原理是細胞增值，需要將培養(yǎng)瓶放入C02培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

（2）動物細胞培養(yǎng)過程中需要用胰蛋白酶處理，消化組織中的膠原纖維，使得組織細胞分散開來。

（3）傳代培養(yǎng)得到的細朐系往往具有異倍體核型。原代培養(yǎng)得到的細胞也可以是細胞系，A正確；細胞株是特殊的細胞系，B正確；連續(xù)細胞系都獲得了不死性，C正確；連續(xù)細胞系肯定都發(fā)生了轉(zhuǎn)化，D錯誤。

（4）細胞克隆又稱為克隆培養(yǎng)法，它的最主要用途之一就是從普通細胞系中分離出缺乏特殊基因突變會田胞系。