Question

15．在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)一種廣泛使用的除草劑（含氮有機化合物）在土壤中不易降解，長期使用可導(dǎo)致土壤污染．為修復(fù)被該除草劑污染的土壤，可按下面程序選育能降解該除草劑的細(xì)菌（已知該除草劑在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明）．
（1）稀釋土壤浸出液時，應(yīng)在酒精燈火焰附近操作．
（2）要在長期使用該除草劑的土壤中分離目的菌，從營養(yǎng)成分和用途分析，上述培養(yǎng)皿應(yīng)該是無氮固體培養(yǎng)基中添加了該除草劑．培養(yǎng)基在各種成分都溶化后分裝前，要進行的操作是調(diào)pH．
（3）對培養(yǎng)基進行滅菌，常采用的方法是高壓蒸汽滅菌法．
（4）在固體培養(yǎng)基上形成的菌落中，無透明帶菌落利用的氮源主要是氮氣（填具體物質(zhì)名稱），有透明帶菌落利用的氮源主要是該除草劑（填具體物質(zhì)名稱），據(jù)此可篩選出目的菌．
（5）科研人員用放射線處理該細(xì)菌獲得兩個突變株A和B，然后對A和B進行實驗，結(jié)果如下表：

接種的菌種	一般培養(yǎng)基	實驗處理及結(jié)果
A	不生長	添加營養(yǎng)物質(zhì)甲，能生長
B	不生長	添加營養(yǎng)物質(zhì)乙，能生長
A+B	能生長	不添加營養(yǎng)物質(zhì)甲、乙就能生長

突變株A不能在一般培養(yǎng)基上生長的直接原因是突變株A缺乏合成營養(yǎng)物質(zhì)甲所需要的酶．突變株A和B混合在一起接種于一般培養(yǎng)基中就能生長，最可能原因是A生長需要的營養(yǎng)物質(zhì)甲，B可以提供；B生長需要的營養(yǎng)物質(zhì)乙，A可以提供．

Answer 1

分析 1、從土壤中篩選分離目的微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株．篩選能降解該除草劑的細(xì)菌需要以該除草劑為唯一的氮源的選擇培養(yǎng)基．
2、圖示是篩選分離能降解該除草劑的細(xì)菌的過程，所用的接種方法是平板劃線法．

解答 解：（1）為了避免雜菌污染，稀釋土壤浸出液時，應(yīng)在酒精燈火焰附近操作．
（2）該除草劑為含氮有機物，為了選育能降解該除草劑的細(xì)菌，應(yīng)采用唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，即無氮的固體培養(yǎng)基中添加該除草劑；培養(yǎng)基在各種成分都溶化后分裝前應(yīng)先調(diào)節(jié)pH，然后再滅菌，否則會引入雜菌；
（3）對培養(yǎng)基進行滅菌，最常使用的就是高壓蒸汽滅菌法；
（4）由于該除草劑的培養(yǎng)基不透明，被菌落分解后可產(chǎn)生透明帶，無透明帶說明除草劑未被分解，菌落利用的氮源就只能是空氣中的氮氣了；而出現(xiàn)透明帶說明除草劑被分解，菌落是分解該除草劑的細(xì)菌，氮源是該除草劑；
（5）根據(jù)題意突變株A在普通培養(yǎng)基中不生長，加營養(yǎng)物質(zhì)甲可以生長，說明突變株A不能合成突變株A必需的營養(yǎng)物質(zhì)甲，同理突變株B不能合成突變株B必需的營養(yǎng)物質(zhì)乙，生物體內(nèi)的生化反應(yīng)都需要酶的參與，不能反應(yīng)就說明缺少相應(yīng)的酶；而將A+B就可以生長，說明A可以提供B所必需的營養(yǎng)物質(zhì)乙，B可以提供A所必需的營養(yǎng)物質(zhì)甲．
故答案為：
（1）酒精燈火焰     
（2）無氮      調(diào)pH
（3）高壓蒸汽滅菌法   
（4）氮氣          該除草劑     
（5）酶     B

點評 解答此類題目的關(guān)鍵是對土壤中微生物的分離這個實驗的熟練掌握，和在微生物實驗中的無菌操作相關(guān)知識的熟練應(yīng)用．