Question

3．某研究性學(xué)習(xí)小組同學(xué)為了調(diào)查北江河中細(xì)菌的污染情況進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)．實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計(jì)數(shù)．請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問(wèn)題．
（1）實(shí)驗(yàn)中制備的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的部分成分列表如下：

成分	牛肉膏	蛋白胨	NaCl	蒸餾水
含量	0.5g	1g	0.5g	100ml

表中各成分含量的比例確定的原則是根據(jù)所培養(yǎng)微生物對(duì)各營(yíng)養(yǎng)成分的需求量（比例）．
（2）對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，通常采用的方法是高壓蒸汽滅菌．為了使培養(yǎng)基達(dá)到良好的滅菌效果，一般在壓力為l00kPa，溫度為121℃℃的條件下，維持15～30min．
（3）為了更好的對(duì)細(xì)菌計(jì)數(shù)，一般采用的接種方法是稀釋涂布平板法，該方法的操作是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后再分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面．
（4）接種后放在恒溫箱培養(yǎng)一段時(shí)間后，為保證結(jié)果準(zhǔn)確，選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)．該組同學(xué)在菌落計(jì)數(shù)時(shí)發(fā)現(xiàn)，統(tǒng)計(jì)的菌落比實(shí)際數(shù)目要低，可能的原因是某些菌落可能是由兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起形成．

Answer 1

分析 1、微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．對(duì)異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō)，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營(yíng)養(yǎng)要素成分時(shí)并不是起單一方面的作用．
2、實(shí)驗(yàn)室的滅菌方法一般有灼燒滅菌（適合于接種工具的滅菌）、干熱滅菌（適合于耐高溫的、需要保持干燥的物品的滅菌）、高壓蒸汽滅菌（適合于培養(yǎng)基等物體的滅菌）．

解答 解：（1）培養(yǎng)基配置的過(guò)程中，成分含量的比例確定的原則是根據(jù)所培養(yǎng)微生物對(duì)各營(yíng)養(yǎng)成分的需求量（比例）．
（2）對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，通常采用的方法是高壓蒸汽滅菌．即將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，為達(dá)到良好的滅菌效果，一般在壓力為100 kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30 min．
（3）為了更好的對(duì)細(xì)菌計(jì)數(shù)，一般采用的接種方法是稀釋涂布平板法，該方法的操作是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后再分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面．
（4）接種后放在恒溫箱培養(yǎng)一段時(shí)間后，為保證結(jié)果準(zhǔn)確，選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)．由于某些菌落可能是由兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起形成，因此統(tǒng)計(jì)的菌落比實(shí)際數(shù)目要低．
故答案為：
（1）根據(jù)所培養(yǎng)微生物對(duì)各營(yíng)養(yǎng)成分的需求量（比例）    
（2）高壓蒸汽滅菌（答蒸氣不得分）    121℃
（3）稀釋涂布平板法    梯度稀釋    涂布
（4）30～300    某些菌落可能是由兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起形成

點(diǎn)評(píng) 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識(shí)，要求考生能夠識(shí)記培養(yǎng)基的成分以及配置的原則，掌握滅菌的方法，識(shí)記稀釋涂布平板法的相關(guān)操作步驟．