A.由甲組數(shù)據(jù)可知，沒有激素的調(diào)節(jié)棉花根也能生長(zhǎng)

B.乙組與甲組和丙組可分別構(gòu)成對(duì)比實(shí)驗(yàn)和對(duì)照實(shí)驗(yàn)

C.NAA和KT對(duì)棉花主根的頂端優(yōu)勢(shì)的作用有協(xié)同作用

D.若去除丁組棉花的主根，則棉花的側(cè)根數(shù)可能會(huì)增多

A. 可在培養(yǎng)基中加入3H-尿嘧啶用以標(biāo)記RNA

B. 參與分子雜交的放射性RNA為相應(yīng)DNA的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物

C. 第0 min時(shí)，與DNA雜交的RNA來自T4噬菌體及大腸桿菌的轉(zhuǎn)錄

D. 隨著感染時(shí)間增加，噬菌體DNA的轉(zhuǎn)錄增加，細(xì)菌基因活動(dòng)受到抑制

【題目】有機(jī)物F( )是合成某種藥物的中間體，它的一種合成路線如下：

回答下列問題：

(1)A物質(zhì)的名稱______，分子中處于同一平面的原子最多有____個(gè)。

(2)E中官能團(tuán)名稱是_____，①～④中屬于加成反應(yīng)的是_______(填序號(hào))。

(3)反應(yīng)③的化學(xué)方程式為______________。

(4)反應(yīng)⑤的生成物有兩種，除了F以外，另一種生成物的名稱是______。

(5)滿足下列條件的D的同分異構(gòu)體有______種。

①能與FeCl3溶液發(fā)生顯色反應(yīng)； ②能發(fā)生銀鏡反應(yīng)； ③分子中有1個(gè)甲基

(6)仿照E的合成路線，設(shè)計(jì)一種由合成的合成路線_________________。

（1）首先，從樣本中提取病毒RNA，經(jīng)_____酶作用生成cDNA。然后以cDNA為模板 進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光PCR擴(kuò)增，測(cè)定樣品中病毒核酸量。

（2）通過實(shí)時(shí)熒光PCR擴(kuò)增目的基因，需額外添加熒光標(biāo)記探針（一小段單鏈DNA，可與目的基因中部序列特異性結(jié)合）。當(dāng)探針完整時(shí)，不產(chǎn)生熒光。在PCR過程中，與目的基因結(jié)合的探針被TaqDNA聚合酶水解，R與Q分離后，R發(fā)出的熒光可被檢測(cè)到（如圖 1）。

① 當(dāng)樣本中有目的基因時(shí)，引物和探針與目的基因退火，通過形成_____而特異性結(jié)合。

② 在 PCR 循環(huán)的_____階段，TaqDNA 聚合酶催化子鏈的合成并水解探針。檢測(cè)到的熒光強(qiáng)

（3）在通過實(shí)時(shí)熒光 PCR 檢測(cè)新型冠狀病毒感染時(shí)，檢測(cè)到的熒光強(qiáng)度變化如圖 2 所示。

① 與指數(shù)增長(zhǎng)期相比，線性增長(zhǎng)期目的基因數(shù)量的增長(zhǎng)率下降，原因有_____。

② Ct 值的含義：在 PCR 擴(kuò)增過程中，每個(gè)反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定的熒光閾值時(shí)所經(jīng)歷的擴(kuò)增循環(huán)數(shù)。因此，當(dāng)樣本中初始模板越多時(shí)，Ct 值就_____。

③ 某新型冠狀病毒核酸檢測(cè)說明書標(biāo)明，Ct≤37 判定為陽(yáng)性，Ct>40 或無 Ct 值判定為陰性。圖 2 所示新型冠狀病毒核酸檢測(cè)結(jié)果應(yīng)判定為_____。

（4）陰性結(jié)果也不能排除新型冠狀病毒感染。可能產(chǎn)生假陰性的因素有_____。

a．取樣太早，樣本中病毒量少，達(dá)不到實(shí)時(shí)熒光 PCR 檢測(cè)閾值

b．樣本被污染，RNA酶將病毒RNA降解

c．病毒發(fā)生變異

（1）科研人員用顯微注射技術(shù)將重組質(zhì)粒M轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞A中，細(xì)胞A應(yīng)該是________。

（2）科研人員用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)胰島素基因是否整合到轉(zhuǎn)基因母羊的DNA上，以________為探針，使探針與羊基因組的DNA雜交，如果顯示出________，則表明胰島素基因已插入染色體DNA中。

（3）受體細(xì)胞B應(yīng)該是萵苣的________（填“體細(xì)胞”“卵細(xì)胞”或“受精卵”），過程②常用的方法是________。導(dǎo)入該細(xì)胞后，需對(duì)該細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)，經(jīng)________過程形成愈傷組織。

（4）轉(zhuǎn)基因羊乳腺細(xì)胞分泌的胰島素經(jīng)檢測(cè)具有生物活性，請(qǐng)回答，轉(zhuǎn)基因大腸桿菌產(chǎn)生的胰島素________（填“有生物活性”或“無生物活性”）。其原因是___________________。

（1）利用 PCR 技術(shù)，將野生番茄的抗黃萎病基因 Ve 與禾谷鐮刀菌的識(shí)別基因 FG 進(jìn)行重組，構(gòu)建融合基因 Ve-FG（如圖 1）。

① 設(shè)計(jì) 3 對(duì)引物。其中引物 2 的一部分序列與 C 片段一部分序列互補(bǔ)，另一部分序列與_____片段一部分序列互補(bǔ)。

② 通過 PCR 分別克隆A、C、P 片段�？寺� A 片段應(yīng)選用的引物是_____。

③ 以 A、C、P 片段為_____進(jìn)行延伸，將 A、P、C 片段拼接，再以引物 1、4 進(jìn)行 PCR，擴(kuò)增融合基因 Ve-FG。

（2）用_____將 Ve-FG 與質(zhì)粒連接，構(gòu)建重組質(zhì)粒（如圖 2，圖中潮霉素抗性基因只在植物細(xì)胞中表達(dá)）。將農(nóng)桿菌與重組質(zhì)�；旌�，一段時(shí)間后涂布到含有_____的平板培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選。用含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化擬南芥，幾周后收獲種子，種在含有潮霉素的培養(yǎng)基上，獲得轉(zhuǎn)基因擬南芥株系 1 和株系 2。

（3）分別提取株系 1 和 2、非轉(zhuǎn)基因擬南芥植株葉片中的 DNA 作為模板，PCR 擴(kuò)增 Ve-FG 基因后進(jìn)行電泳，結(jié)果如圖 3。

① 電泳時(shí)應(yīng)以_____為陽(yáng)性對(duì)照。

② 成功導(dǎo)入 Ve-FG 基因的是_____。

③ 株系 1 可抗潮霉素，但電泳結(jié)果無陽(yáng)性條帶，原因可能是_____。

（4）為檢驗(yàn)融合基因 Ve-FG 的功能，以導(dǎo)入 Ve-FG 基因的植株為實(shí)驗(yàn)組，導(dǎo)入空白質(zhì)粒的植株為對(duì)照組，分別接種_____。一段時(shí)間后觀察發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照植株相比，實(shí)驗(yàn)組整體長(zhǎng)勢(shì)更旺盛，葉片萎蔫程度、葉片變黃程度也較輕，這表明_____。

（1）利用合成培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，培養(yǎng)基中需加入水、葡萄糖、_____、維生素、無 機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。為防止污染，需對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行_________處理，以及在無菌環(huán)境下進(jìn)行操作。

（2）將貼壁生長(zhǎng)型 MDCK 細(xì)胞進(jìn)行馴化，可使之適應(yīng)懸浮培養(yǎng)。與貼壁培養(yǎng)相比，懸浮培養(yǎng)利于提高細(xì)胞密度，傳代培養(yǎng)時(shí)不需要用_____消化，操作更簡(jiǎn)單。

（3）通過克隆化培養(yǎng)，獲得若干單克隆細(xì)胞株。需要從這些單克隆細(xì)胞株中篩選出高產(chǎn)流感病毒的細(xì)胞株，請(qǐng)寫出篩選的思路_____。

（4）用 MDCK 細(xì)胞培養(yǎng)甲型 H1N1 流感病毒，制成疫苗后對(duì)小鼠進(jìn)行免疫接種（第一次免疫兩周后進(jìn)行第二次免疫）。第二次免疫后兩周接種甲型 H1N1 流感病毒，測(cè)定免疫效果，結(jié)果如圖 1、圖 2。

① 由圖 1 可知，用兩種疫苗免疫小鼠，均可產(chǎn)生較高水平的抗體，說明兩種疫苗均可激發(fā)小鼠對(duì)流感病毒的_____免疫應(yīng)答。

② 由圖 2 可知，兩種疫苗都對(duì)小鼠有較好的_____作用。

（1）與醋酸菌的醋酸發(fā)酵相比，利用酵母菌制作果酒需要的環(huán)境條件是_____。

（2）對(duì)培養(yǎng)液、培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌常采用的方法是______，對(duì)接種器進(jìn)行滅菌常采用的方法是________。

（3）在擴(kuò)大培養(yǎng)時(shí)，液體培養(yǎng)液中酒精的作用是______。在分離培養(yǎng)時(shí)，對(duì)擴(kuò)大培養(yǎng)后的樣液進(jìn)行梯度稀釋，其目的是______。

（4）在分離培養(yǎng)時(shí)，醋酸菌的代謝產(chǎn)物能使碳酸鈣分解，從而在醋酸菌菌落的周圍會(huì)出現(xiàn)________，應(yīng)選擇________的菌落為目的菌。

（1）試驗(yàn)中所用培養(yǎng)基均含有水、葡萄糖、酵母浸膏和酒精，其中葡萄糖可為醋酸菌的生長(zhǎng)提供_________。配制分離培養(yǎng)基時(shí)，除營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需要添加2%的碳酸鈣和_____，以便觀察醋酸與碳酸鈣反應(yīng)后菌落周圍形成的透明圈。

（2）分離醋酸菌時(shí)，需將富集的醋酸菌培養(yǎng)液進(jìn)行梯度稀釋，采用_____法接種到分離平板上。30℃培養(yǎng)72h后，挑取透明圈_____的單菌落進(jìn)行劃線分離。分離出的單菌落接種到斜面培養(yǎng)基（含3%酒精）上并于4℃保藏。

（3）取保藏的三個(gè)菌株分別接種于發(fā)酵培養(yǎng)液（含5%酒精）中，30℃培養(yǎng)5d后測(cè)產(chǎn)酸量， 篩選出高產(chǎn)酸的醋酸桿菌J2菌株。將J2與AS1.41分別接種到含不同濃度酒精的培養(yǎng)液中，30℃培養(yǎng)24h后測(cè)定活菌數(shù)量，結(jié)果如圖2。由圖 2 可知，酒精可_____醋酸菌的生長(zhǎng)。與 AS1.41 相比，J2 菌株對(duì)酒精的耐受性___________。

（4）獲得 J2 菌株后，還可以采取_____的育種措施，進(jìn)一步提高其酒精耐受性。

（5）篩選出 J2 菌株后，其高產(chǎn)酸特性的遺傳是否穩(wěn)定還需檢測(cè)，請(qǐng)寫出基本過程。_____

實(shí)驗(yàn)材料：9 只健康的大鼠、高糖高脂飼料、普通飼料、30%鏈脲佐菌素、干細(xì)胞懸液、生理鹽水、注射器、血糖測(cè)定儀。（要求與說明：具體操作不作要求；實(shí)驗(yàn)條件適宜）

（1）實(shí)驗(yàn)思路與處理：

①將 9 只健康的大鼠隨機(jī)均分為甲、乙、丙三組。

②分組處理情況：_________________________________________________。

③一段時(shí)間后，____________________________________________________。

④分組處理情況：________________________________________________________ 。

⑤每隔一段時(shí)間，____________________________________。

（2）預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果（以坐標(biāo)曲線圖形式表示實(shí)驗(yàn)結(jié)果，其中橫坐標(biāo)為處理時(shí)間）_________________________________。

（3）分析與討論：

①實(shí)驗(yàn)中采用干細(xì)胞移植的方法治療糖尿病大鼠時(shí)，為追蹤干細(xì)胞成活、分化等情況，研究人員設(shè)計(jì)了如下方法：選用正常雄性大鼠作供體，將干細(xì)胞移植到雌性糖尿病大鼠體內(nèi)， 干細(xì)胞的_________可作為追蹤的標(biāo)記物。

②環(huán)孢霉素A 是一種免疫抑制藥物，注射環(huán)孢霉素 A 可提高移植的成功率，這說明環(huán)孢霉素A主要通過抑制______________細(xì)胞的功能來發(fā)揮作用。