Question

14．生活飲用水已經(jīng)過沉淀、過濾、加氯消毒等處理，含微生物很少，但當(dāng)其水源水不潔或處理達(dá)不到要求時(shí)，仍然會(huì)含相當(dāng)量的微生物甚至含有致病性微生物；供水管道破損及二次供水等環(huán)節(jié)也可能導(dǎo)致生活飲用水的污染．因此生活飲用水的微生物安全性日常檢測(cè)是很重要的．我國生活飲用水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)（GB5749-85）中規(guī)定生活飲用水中細(xì)菌總數(shù)不得大于100個(gè)/mL，總大腸菌群不得大于3個(gè)/L．
（1）檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí)，通常將水樣進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量，這種方法稱為稀釋涂布平板法．如果在培養(yǎng)基中出現(xiàn)了單個(gè)菌落，產(chǎn)生每個(gè)菌落的最初細(xì)胞數(shù)目是1個(gè)．
（2）用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)是否需要設(shè)置對(duì)照組？需要
為什么？因?yàn)樾枰�判斷培養(yǎng)基是否被污染．
（3）純化大腸桿菌時(shí)使用的培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法滅菌，關(guān)鍵的步驟是接種，純化培養(yǎng)方法除（1）中的外還有平板劃線法．
（4）如果要測(cè)定水中的病毒種類，可以用PCR技術(shù)使其遺傳物質(zhì)擴(kuò)增，PCR技術(shù)的原理是DNA雙鏈復(fù)制，該過程使用的酶為Taq酶（耐高溫的DNA聚合酶）．

Answer 1

分析 稀釋平板計(jì)數(shù)是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個(gè)菌落，即是由一個(gè)單細(xì)胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征設(shè)計(jì)的計(jì)數(shù)方法，即一個(gè)菌落代表一個(gè)單細(xì)胞．
計(jì)數(shù)時(shí)，首先將待測(cè)樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細(xì)胞分散開，使成單個(gè)細(xì)胞存在（否則一個(gè)菌落就不只是代表一個(gè)細(xì)胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)．經(jīng)培養(yǎng)后，由單個(gè)細(xì)胞生長繁殖形成菌落，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目，即可計(jì)算出樣品中的含菌數(shù)．此法所計(jì)算的菌數(shù)是培養(yǎng)基上長出來的菌落數(shù)，故又稱活菌計(jì)數(shù)．

解答 解：（1）對(duì)微生物的分離常用稀釋涂布平板法和平板劃線法進(jìn)行接種，但稀釋涂布平板法適用于微生物的計(jì)數(shù)．如果在培養(yǎng)基中出現(xiàn)了單個(gè)菌落，產(chǎn)生每個(gè)菌落的最初細(xì)胞是一個(gè)．
（2）由于需要判斷培養(yǎng)基是否被污染，所以用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)需要設(shè)置對(duì)照組．
（3）純化大腸桿菌時(shí)使用的培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法滅菌，不可用加入抗生素的方法防止雜菌感染．關(guān)鍵的步驟是 接種，純化培養(yǎng)方法稀釋涂布平板法外，還有 平板劃線法．
（4）PCR技術(shù)的原理是運(yùn)用了DNA復(fù)制的原理，該過程中需要使用耐高溫的DNA聚合酶．
故答案為：
（1）稀釋涂布平板法    1 
（2）需要   因?yàn)樾枰�判斷培養(yǎng)基是否被污染
（3）高壓蒸汽滅菌       接種     平板劃線法
（4）DNA雙鏈復(fù)制     Taq酶（耐高溫的DNA聚合酶）

點(diǎn)評(píng) 本題旨在考查微生物的分離和培養(yǎng)、某種微生物數(shù)量的測(cè)定和培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇利用，意在考查具備驗(yàn)證簡單生物學(xué)事實(shí)的能力，并能對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析和處理，具有對(duì)一些生物學(xué)問題進(jìn)行初步探究的能力．