Question

7．已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷．人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖．鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖．將這兩種細(xì)胞在培養(yǎng)皿中混合，加促融劑促進(jìn)細(xì)胞融合，獲得雜種細(xì)胞，并生產(chǎn)單克隆抗體．請(qǐng)回答：
（1）生產(chǎn)單克隆抗體時(shí)，一般不能直接培養(yǎng)相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞來獲取，主要原因是B淋巴細(xì)胞不能無限增殖．
（2）①過程中，常用聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，該過程依據(jù)的生物學(xué)原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性．
（3）為了從培養(yǎng)液中分離出雜種細(xì)胞，需在③過程向培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，理由是雜交瘤細(xì)胞可利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA，從而才能在該培養(yǎng)液中增殖，而骨髓瘤細(xì)胞不能增殖．
（4）④表示雜交瘤細(xì)胞的擴(kuò)大培養(yǎng)，其既可在體外培養(yǎng)，也可注射到小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)．體內(nèi)培養(yǎng)與體外培養(yǎng)相比，其優(yōu)點(diǎn)是無需再提供營養(yǎng)物質(zhì)以及無菌環(huán)境，操作簡便．
（5）該方法生產(chǎn)的抗體與血清抗體相比，主要的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈明度高、可大量制備．

Answer 1

分析 1、分析題圖：①是誘導(dǎo)細(xì)胞融合，②利用特定選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)并篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，③用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，④是培養(yǎng)篩選出的雜交瘤細(xì)胞
2、單克隆抗體制備過程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，即AB型細(xì)胞（A為B淋巴細(xì)胞，B為骨髓瘤細(xì)胞），不需要A、B、AA、BB型細(xì)胞．第二次篩選：利用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞．

解答 解：（1）B淋巴細(xì)胞不能無限增殖，故生產(chǎn)單克隆抗體時(shí)，一般不直接利用一個(gè)B淋巴細(xì)胞．
（2）①誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合，常用的與植物細(xì)胞融合相同的誘導(dǎo)劑是聚乙二醇，該過程依據(jù)的生物學(xué)原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性．
（3）在培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，培養(yǎng)后收集增殖細(xì)胞．加入氨基嘌呤后，使D合成途徑阻斷，僅有D全合成途徑的骨髓細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖，淋巴細(xì)胞一般不分裂增殖．因此培養(yǎng)液中加入該物質(zhì)后，不能生長的細(xì)胞有骨髓瘤細(xì)胞、融合的淋巴細(xì)胞、融合的骨髓瘤細(xì)胞、淋巴細(xì)胞．人淋巴細(xì)胞和骨髓癌細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞中可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖．
（4）④表示雜交瘤細(xì)胞的擴(kuò)大培養(yǎng)，其既可在體外培養(yǎng)，也可注射到小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)．體內(nèi)培養(yǎng)與體外培養(yǎng)相比，其優(yōu)點(diǎn)是無需再提供營養(yǎng)物質(zhì)以及無菌環(huán)境，操作簡便．
（5）該方法生產(chǎn)的單克隆抗體與血清抗體相比，主要的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈明度高、可大量制備．
故答案為：
（1）B淋巴細(xì)胞不能無限增殖　
（2）聚乙二醇　細(xì)胞膜的流動(dòng)性  
（3）氨基嘌呤　淋巴細(xì)胞中的S
（4）無需再提供營養(yǎng)物質(zhì)以及無菌環(huán)境，操作簡便　
（5）特異性強(qiáng)、靈明度高、可大量制備

點(diǎn)評(píng) 本題考查單克隆抗體的制備過程，意在考查考生分析題文中提取有效信息和得出正確結(jié)論的能力；識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，解決生物學(xué)問題的能力．