Question

3．目前，精子載體法逐漸成為最具有活力的制備轉(zhuǎn)基因動物的方法之一，該方法以精子作為外源基因的載體使精子攜帶外源基因進入卵細胞受精．如圖表示利用該方法制備轉(zhuǎn)基因鼠的基本流程．請據(jù)圖回答：

（1）獲取外源基因用到的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶，為了提高實驗成功率，通常利用PCR技術(shù)獲得大量標記的外源基因．
（2）外源基因能夠整合到精子的染色體上是提高轉(zhuǎn)化率的關(guān)鍵，因為受精時只有精子的頭部才能進入卵細胞中．
（3）過程②采用的是體外受精技術(shù)，該過程中應(yīng)對已經(jīng)導(dǎo)入外源基因的精子進行獲能處理．自然受精中防止多精入卵的兩道屏障依次是透明帶反應(yīng)和卵細胞膜反應(yīng)．
（4）由于目前人們對動物細胞所需營養(yǎng)物質(zhì)還沒有完全搞清楚，因此在培養(yǎng)細胞時需在培養(yǎng)液中加入動物血清．
（5）一般來說，胚胎發(fā)育到桑椹胚階段或囊胚階段時適宜用作胚胎移植．

Answer 1

分析 根據(jù)題意和圖示分析可知：圖示首先通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)將目的基因?qū)�入到成熟精子的染色體中，再通過體外受精作用將目的基因移入到受精卵中，再通過早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植，最終獲得轉(zhuǎn)基因鼠．因此①是轉(zhuǎn)化目的基因進入精子的染色體上，②是體外受精，③是早期胚胎培養(yǎng)，④是胚胎移植．

解答 解：（1）獲取目的基因時，需要限制酶切割．PCR擴增技術(shù)可以在短時間內(nèi)大量擴增目的基因．
（2）精子與卵細胞受精時，將精子的頭部進入卵細胞中，并釋放其細胞核進入卵細胞，但細胞質(zhì)未進入．因此為了提高轉(zhuǎn)化率，必須將外源基因整合到精子的染色體中，才可以使外源基因進入受精卵中．
（3）②表示體外受精過程，因此需要采用體外受精技術(shù)．精子必須獲能才可以與卵細胞發(fā)生受精作用．自然受精中防止多精入卵的兩道屏障依次是透明帶反應(yīng)和卵細胞膜反應(yīng)．
（4）由于目前人們對動物細胞所需營養(yǎng)物質(zhì)還沒有完全搞清楚，因此在培養(yǎng)細胞時需在培養(yǎng)液中加入動物血清．
（5）一般來說，胚胎發(fā)育到桑椹胚階段或囊胚階段時適宜用作胚胎移植．
故答案為：
（1）限制性核酸內(nèi)切酶    PCR    
（2）染色體   頭部
（3）體外受精   獲能   透明帶 卵細胞膜
（4）動物血清
（5）桑椹胚  囊胚

點評 本題結(jié)合圖解，考查基因工程和細胞工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各步驟中的細節(jié)問題；識記動物細胞培養(yǎng)的過程、條件等知識，能結(jié)合所學(xué)的知識準確答題．