Question

4．已知某傳染性疾病的病原體為DNA病毒，該病嵩表面的A蛋白為豐要抗原．注射疫苗蛋白可以預(yù)防該傳染�。�某科研機(jī)構(gòu)欲培育出羊乳腺生物發(fā)生器，以實(shí)現(xiàn)該疫苗蛋白生產(chǎn)的產(chǎn)業(yè)化．
（1）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，可將A基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起，然后將基因表達(dá)載體導(dǎo)人羊的受精卵中．
（2）檢測(cè)目的基因是否已整合到受體細(xì)胞染色體DNA上，可采用DNA分子雜交技術(shù)，即將目的基因探針與受體細(xì)胞染色體DNA（或目的基因探針與受體細(xì)胞基因組DNA）雜交．
（3）如果轉(zhuǎn)基因成功，則在轉(zhuǎn)基因羊的乳腺細(xì)胞中可檢測(cè)出A基因、A基因的mRNA和A蛋白．
（4）在轉(zhuǎn)基因羊的培育過(guò)程中，所用到的主要胚胎工程技術(shù)有早期胚胎培養(yǎng)或胚胎移植．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）要培育羊乳腺生物發(fā)生器，在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，可將A基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起，然后采用顯微注射法將基因表達(dá)載體導(dǎo)人羊的受精卵中（受精卵的全能性最高）．
（2）檢測(cè)目的基因是否已整合到受體細(xì)胞染色體DNA上，可采用DNA分子雜交技術(shù)，即將目的基因探針與受體細(xì)胞染色體DNA（或目的基因探針與受體細(xì)胞基因組DNA）雜交，若出現(xiàn)雜交帶，則說(shuō)明目的基因已整合到受體細(xì)胞染色體DNA上．
（3）如果轉(zhuǎn)基因成功，則表明目的基因已經(jīng)成功導(dǎo)入受體細(xì)胞，且在受體細(xì)胞中已經(jīng)成功表達(dá)，因此在轉(zhuǎn)基因羊的乳腺細(xì)胞中可檢測(cè)出A基因、A基因mRNA和A蛋白．
（4）在轉(zhuǎn)基因羊的培育過(guò)程中，所用到的主要胚胎工程技術(shù)有早期胚胎培養(yǎng)或胚胎移植．
故答案為：
（1）乳腺蛋白基因    受精卵
（2）目的基因探針與受體細(xì)胞染色體DNA（或目的基因探針與受體細(xì)胞基因組DNA）
（3）A基因的mRNA     A蛋白
（4）早期胚胎培養(yǎng)或胚胎移植

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各步驟中需要注意的細(xì)節(jié)問(wèn)題；識(shí)記胚胎工程的相關(guān)技術(shù)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．