【題目】腸出血性大腸桿菌是能導(dǎo)致人體患病的為數(shù)不多的幾種大腸桿菌中的一種,人體感染該種大腸桿菌后的主要癥狀是出血性腹瀉,感染嚴(yán)重者可出現(xiàn)溶血性尿毒綜合征(HUS),危及生命。該大腸桿菌在血平板(培養(yǎng)基中添加適量血液)上生長(zhǎng)時(shí),可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞,使其褪色,從而形成透明圈。下圖為從被腸出血性大腸桿菌污染的食物中分離和提純?cè)摯竽c桿菌的操作流程示意圖。請(qǐng)回答下列相關(guān)問題:

1)肉湯培養(yǎng)基可為培養(yǎng)的微生物提供的營(yíng)養(yǎng)成分包括________________________

2)以上操作中在血平板上的接種方法是________________;第一次接種操作前和整個(gè)接種操作結(jié)束后均需要對(duì)接種工具進(jìn)行灼燒滅菌,其目的分別是________________。

3)為了進(jìn)一步研究該大腸桿菌的抗原性,常利用________法分離其蛋白質(zhì),若甲蛋白質(zhì)比乙蛋白質(zhì)后洗脫出來,則相對(duì)分子質(zhì)量較大的是________。在裝填凝膠柱時(shí),不得有氣泡產(chǎn)生,是因?yàn)?/span>________________。

【答案】碳源、氮源、水、無機(jī)鹽等 平板劃線法 殺死接種環(huán)上的微生物,避免污染培養(yǎng)基(滅菌) 避免污染環(huán)境和感染操作者 凝膠色譜 乙蛋白質(zhì) 氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫順序降低分離效果

【解析】

凝膠色譜法(分配色譜法):①原理:分子量大的分子通過多孔凝膠顆粒的間隙,路程短,流動(dòng)快;分子量小的分子穿過多孔凝膠顆粒內(nèi)部,路程長(zhǎng),流動(dòng)慢。②凝膠材料:多孔性,多糖類化合物,如葡聚糖、瓊脂糖。③分離過程:混合物上柱洗脫大分子流動(dòng)快、小分子流動(dòng)慢收集大分子收集小分子,洗脫:從色譜柱上端不斷注入緩沖液,促使蛋白質(zhì)分子的差速流動(dòng)。④作用: 分離蛋白質(zhì),測(cè)定生物大分子分子量,蛋白質(zhì)的脫鹽等。

1)肉湯培養(yǎng)基是天然培養(yǎng)基,可為培養(yǎng)的微生物提供的營(yíng)養(yǎng)成分包括碳源、氮源、水、無機(jī)鹽等。

2)圖示中用到了接種環(huán)從液體培養(yǎng)基中接種到固體培養(yǎng)基中,因此在血平板上的接種方法是平板劃線法。第一次接種操作前對(duì)接種工具進(jìn)行灼燒滅菌,其目的是殺死接種環(huán)上的微生物,避免污染培養(yǎng)基(滅菌),整個(gè)接種操作結(jié)束后對(duì)接種工具進(jìn)行灼燒滅菌,其目的是避免污染環(huán)境和感染操作者。

3)為了進(jìn)一步研究該大腸桿菌的抗原性,常利用凝膠色譜法分離其蛋白質(zhì)。分子量大的分子通過多孔凝膠顆粒的間隙,路程短,流動(dòng)快,若甲蛋白質(zhì)比乙蛋白質(zhì)后洗脫出來,則相對(duì)分子質(zhì)量較大的是乙蛋白質(zhì)。在裝填凝膠柱時(shí)有氣泡產(chǎn)生,就會(huì)在色譜柱內(nèi)形成無效的空隙,使本該進(jìn)入凝膠內(nèi)部的樣品分子從這些空隙中通過,攪亂洗脫液的流動(dòng)次序,影響分離的效果。

練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

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【題目】下圖為夏季晴朗的一天,生長(zhǎng)狀況相同的油桃在露天和溫室大棚兩種種植模式下的凈光合速率 P0)變化曲線圖。請(qǐng)據(jù)圖分析回答下列問題:

lc點(diǎn)時(shí),油桃葉肉細(xì)胞中產(chǎn)生ATP的場(chǎng)所有____mn段,油桃體內(nèi)的有機(jī)物 ___(填“增多”“減少”或“不變”),理由是____。

2bc段、ef段、mn段和op段的凈光合速率均下降,從光合作用過程分析,其中下降原因相同的是_________。

37時(shí)~8時(shí),ab段光合速率上升得比曲段快的原因主要為 ___。

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【題目】VNN1基因(1542bp)與炎癥相關(guān)性疾病有關(guān),GFP基因(4735bp)控制綠色熒光蛋白的合成,該蛋白可在相應(yīng)波長(zhǎng)的紫外光激發(fā)下發(fā)出綠色熒光。某研究小組進(jìn)行鼠源GFP - VNNI重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其功能研究,回答下列問題:

l)為構(gòu)建重組質(zhì)粒,研究小組從數(shù)據(jù)庫查找到VNNlDNA序列,并設(shè)計(jì)引物。上游引物:5-AAGCTTCCGCTGCACCATGACTACTC-3下劃線為HindⅢ酶切位點(diǎn)),下游引物:5-GGATCCGCTCGAGCTACCAACTTAATGA-3(下劃線為BamHI酶切位點(diǎn)),之后進(jìn)行PCR擴(kuò)增,PCR的原理是________。擴(kuò)增后的VNNI基因要與含GFP基因的載體連接,需用________(填具體酶)切割VNNI基因和含GFP基因的載體,再用________酶處理,構(gòu)建重組質(zhì)粒。

2GFP基因在重組質(zhì)粒中可作為________________,其作用是________。用之前相同的限制酶對(duì)GFP - VNNI重組質(zhì)粒切割后,進(jìn)行電泳鑒定時(shí)得到如圖1所示的部分條帶,結(jié)果表明________

3IL -6為體內(nèi)重要的炎癥因子,能與相應(yīng)的受體結(jié)合,激活炎癥反應(yīng)。圖2GFP-VNNI重組質(zhì)粒對(duì)細(xì)胞分泌IL -6的影響,由此說明________________,同時(shí)發(fā)現(xiàn)與正常組比較,空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組IL-6的表達(dá)有輕微升高,造成這種現(xiàn)象的可能原因是________________________。

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【題目】圖是人小腸上皮細(xì)胞吸收葡萄糖的過程簡(jiǎn)圖,其中GLUT2是細(xì)胞膜上的葡萄糖載體,Na+/K+ATPase是鈉鉀ATP酶,據(jù)圖分析下列說法錯(cuò)誤的是:

A. 小腸上皮細(xì)胞面向腸腔的細(xì)胞膜形成較多微絨毛可以增加細(xì)胞膜上載體蛋白的數(shù)量,高效的吸收葡萄糖等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)

B. 圖中所示的小腸上皮細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)的功能有催化、運(yùn)輸、信息交流和密封細(xì)胞間隙的作用

C. 葡萄糖通過 Na+驅(qū)動(dòng)的葡萄糖同向轉(zhuǎn)運(yùn)載體進(jìn)入小腸上皮細(xì)胞,此運(yùn)輸方式為主動(dòng)運(yùn)輸

D. Na+/K+ATPase也存在神經(jīng)元細(xì)胞膜上,參與了動(dòng)作電位恢復(fù)為靜息電位的過程

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【題目】水蚤是一種體型微小的水生動(dòng)物。圖是某水城中水蚤種群數(shù)量的變化圖,下列分析正確的是(

A.調(diào)查水蚤種群數(shù)量的變化時(shí),宜采用標(biāo)志重捕法

B.b 時(shí)期水蚤種群數(shù)量增長(zhǎng)最快,b~c時(shí)期出生率小于死亡率

C.當(dāng)水蚤種群數(shù)量穩(wěn)定在K1時(shí),其種群年齡結(jié)構(gòu)為穩(wěn)定型

D.d時(shí)期種群出生率升高,則種群數(shù)量可大幅度超過K。

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【題目】某同學(xué)進(jìn)行的探究實(shí)驗(yàn)一環(huán)境因素對(duì)光合作用強(qiáng)度的影響:圖甲是探究在溫度為30℃時(shí)影響植物光合速率的因素的實(shí)驗(yàn)裝置圖;圖乙表示該植物的某葉肉細(xì)胞在光照強(qiáng)度分別為a、b、c、d時(shí),單位時(shí)間內(nèi)葉肉細(xì)胞CO2釋放量和葉綠體O2產(chǎn)生總量的變化。請(qǐng)回答:

1)為了避免無關(guān)變量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,在圖甲裝置的燈與試管之間安置了盛水玻璃柱,目的是_____;為了改變光照強(qiáng)度,你認(rèn)為應(yīng)該釆取的措施是_______________。

2)圖乙中光照強(qiáng)度為b時(shí),該葉肉細(xì)胞光合作用速率___________(填“小于”、“等于”或“大于”)呼吸作用速率;光照強(qiáng)度為d時(shí),光反應(yīng)產(chǎn)生的并能夠?yàn)榘捣磻?yīng)所利用的物質(zhì)有___________。

3)已知葉肉細(xì)胞光合作用和呼吸作用的最適溫度分別為25℃和30℃,在其他條件不變的情況下,將溫度調(diào)節(jié)到25℃,若乙圖中的直方柱的高度不發(fā)生改變,則c點(diǎn)應(yīng)該向___________平移。

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【題目】甲、乙、丙三人體檢時(shí)檢測(cè)出尿糖超標(biāo),為進(jìn)一步弄清是否患糖尿病,又進(jìn)行了血液檢測(cè)。 1、圖 2 所示為空腹及餐后測(cè)定的血糖及胰島素濃度。糖尿病血糖濃度標(biāo)準(zhǔn)為:空腹≥7.0 mmol/L, 餐后 2h≥11.1 mmol/L,請(qǐng)回答下列問題:

1)正常人饑餓時(shí)血糖濃度會(huì)下降,此時(shí)主要是_________(填一種激素)分泌增多,該激素的生理功能 _____,從而使血糖水平升高。

2)據(jù)圖初步判斷_____是糖尿病患者,需復(fù)查血糖;颊叱R_____導(dǎo)致細(xì)胞外液滲透壓 升高,大腦皮層產(chǎn)生渴感,表現(xiàn)為多飲。

3)除糖尿病外,尿糖超標(biāo)的原因還可能有_____(寫出兩點(diǎn))。

4)結(jié)合圖 1、圖 2 分析,乙出現(xiàn)上述檢測(cè)結(jié)果的原因可能有_____(寫出一點(diǎn))。

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【題目】氣孔是氣體進(jìn)出葉片及蒸騰作用喪失水分的“門戶”,強(qiáng)光下植物蒸騰作用強(qiáng),氣孔充分開放。氣孔的開放與關(guān)閉分別與保衛(wèi)細(xì)胞的吸水與失水有關(guān)?蒲腥藛T通過基因工程技術(shù)在擬南芥氣孔的保衛(wèi)細(xì)胞中表達(dá)了一種K+通道蛋白(BLINK1),如圖所示。該通道能調(diào)控氣孔快速開啟與關(guān)閉,而野生株氣孔關(guān)閉較慢。請(qǐng)回答下列問題:

1)除離子通道蛋白外,細(xì)胞膜上還有水通道蛋白。水通道與人體體液平衡密切相關(guān),如腎小球的濾過作用和腎小管的重吸收作用,都與水通道蛋白的_________有直接關(guān)系。

2)據(jù)圖分析,含BLINK1的植株在光照下氣孔快速開啟,最可能的原因是__________________。

3)若將長(zhǎng)勢(shì)基本一致的含BLINK1的擬南芥植株與野生株擬南芥植株置于較強(qiáng)光照強(qiáng)度的連續(xù)光照條件下,測(cè)定每升水產(chǎn)植物莖干重(克),預(yù)期結(jié)果是含BLINK1的擬南芥植株每升水產(chǎn)植物莖干重(克)_________(填“大于”“小于”或“基本等于”)野生株擬南芥植株的每升水產(chǎn)植物莖干重(克)。

4)若將長(zhǎng)勢(shì)基本一致的含BLINK1的擬南芥植株與野生株擬南芥植株置于較強(qiáng)光照強(qiáng)度的間隔光照(強(qiáng)光和弱光交替光照)條件下,測(cè)定每升水產(chǎn)植物莖干重(克),預(yù)期結(jié)果是含BLINK1的擬南芥植株每升水產(chǎn)植物莖干重(克)_________(填“大于”“小于”或“基本等于”)野生株擬南芥植株的每升水產(chǎn)植物莖干重(克),預(yù)期此結(jié)果的理由是_________________________。

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【題目】研究人員利用圖示裝置測(cè)定某植物種子的呼吸速率。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(

A.試管內(nèi)加入的試劑是NaOH溶液

B.為排除其他因素于擾,可另設(shè)一裝置,除換用煮熟的種子外,其余條件均與圖示相同

C.紅墨水向右移動(dòng)的距離可代表種子呼吸作用產(chǎn)生的CO2

D.若呼吸作用產(chǎn)生的CO2量小于消耗的O2量,可能是因?yàn)榉N子的脂肪含量較高

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