Question

（10分）多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果膠使細(xì)胞壁破損。成熟的番茄果實(shí)中，PG合成顯著增加，能使果實(shí)變紅變軟，但不利于保鮮。利用基因工程減少PG基因的表達(dá)，可延長(zhǎng)果實(shí)保質(zhì)期�？茖W(xué)家將PG基因反向接到Ti質(zhì)粒上，導(dǎo)入番茄細(xì)胞中，得到轉(zhuǎn)基因番茄，具體操作流程如圖。據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

（1）若已獲取PG的mRNA，可通過(guò) 獲取PG基因。

（2）用含目的基因的農(nóng)桿菌感染番茄原生質(zhì)體后，可用含有 的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。

（3）將轉(zhuǎn)入反向鏈接PG基因的番茄細(xì)胞培育成完整的植株，需要用 技術(shù)；其中，愈傷組織經(jīng)____ 形成完整植株。

（4）用含目的基因的農(nóng)桿菌感染番茄原生質(zhì)體后，培養(yǎng)24～48h后取樣，在質(zhì)量分?jǐn)?shù)為25%的蔗糖溶液中，通過(guò)觀察細(xì)胞是否發(fā)生__ 現(xiàn)象來(lái)鑒別細(xì)胞壁是否再生。

 

Answer 1

（10分，每空2分）（1）逆轉(zhuǎn)錄法 （2）卡那霉素 （3）植物組織培養(yǎng) 再分化（或細(xì)胞增殖與分化） （4）質(zhì)壁分離

【解析】

試題分析：（1）已獲取PG的mRNA，可通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄法，即以此mRNA為模板，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄酶催化，在體外逆轉(zhuǎn)錄合成DNA。

（2）從圖中可知PG基因反向鏈接到質(zhì)粒的四環(huán)素抗性基因中，則四環(huán)素抗性基因被破壞，而質(zhì)粒上還含有卡那霉素抗性基因，故含目的基因的農(nóng)桿菌感染番茄細(xì)胞后將會(huì)使受體細(xì)胞獲得抗卡那霉素的能力，所以可用含卡那霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。

（3）因需將轉(zhuǎn)入反向鏈接PG基因的番茄細(xì)胞培養(yǎng)成完整的植株，應(yīng)利用植物細(xì)胞的全能性進(jìn)行植物組織培養(yǎng)；其過(guò)程是植物細(xì)胞經(jīng)過(guò)脫分化作用，形成愈傷組織，經(jīng)過(guò)再分化作用，愈傷組織又能重新分化為有結(jié)構(gòu)的組織和器官，最終形成完整的植株。

（4）有細(xì)胞壁的植物細(xì)胞在質(zhì)量分?jǐn)?shù)為25%的蔗糖溶液中會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象，可以用來(lái)鑒別細(xì)胞壁是否再生。

考點(diǎn)：本題考查基因工程的原理及技術(shù)、植物的組織培養(yǎng)，意在考查學(xué)生能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，通過(guò)比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論。