Question

14．回答下列有關(guān)基因工程的問(wèn)題：
（1）基因工程中常用的工具酶有限制酶、DNA連接酶．E•coli  DNA連接酶可以連接黏性末端，T₄DNA連接酶可以連接平末端和黏性末端．
（2）基因工程中常用的載體有質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒等．基因表達(dá)載體除了具有目的基因外，還必須有啟動(dòng)子、終止子以及標(biāo)記基因等．
（3）為使目的基因的遺傳特征得以穩(wěn)定持續(xù)和表達(dá)，需將目的基因插入轉(zhuǎn)基因生物的DNA，若想檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，常用的檢測(cè)方法是DNA分子雜交技術(shù)．

Answer 1

分析 1、基因工程的工具：
（1）限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．
（2）DNA連接酶：連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵．
（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒．
2、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：
分子水平上的檢測(cè)：
①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；
②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；
③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．
個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）基因工程中常用的工具酶有限制酶、DNA連接酶．E•coli DNA連接酶可以連接黏性末端，T₄DNA連接酶可以連接黏性末端和平末端．
（2）基因工程中常用的載體有質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒等．基因表達(dá)載體除了具有目的基因外，還必須有啟動(dòng)子、終止子以及標(biāo)記基因等．
（3）為使目的基因的遺傳特征得以穩(wěn)定持續(xù)和表達(dá)，需將目的基因插入轉(zhuǎn)基因生物的DNA，若想檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，常用的檢測(cè)方法是DNA分子雜交技術(shù)．
故答案為：
（1）限制酶    DNA連接酶      黏性     平末端和黏性
（2）噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒          啟動(dòng)子     標(biāo)記基因
（3）DNA     DNA分子雜交技術(shù)

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作步驟等，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．