Question

5．科學(xué)家從某無限增殖的細(xì)胞中分離出無限增殖調(diào)控基因（prG），該基因能激發(fā)細(xì)胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景．請(qǐng)回答下列問題：：
（1）利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體，常用聚乙二醇、滅活的病毒、電激等誘導(dǎo)因素誘導(dǎo)細(xì)胞融合．再經(jīng)多次篩選和細(xì)胞培養(yǎng)獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞．
（2）有人提出用核移植技術(shù)構(gòu)建重組細(xì)胞來生產(chǎn)單克隆抗體，請(qǐng)完成設(shè)計(jì)方案：
①取特定抗原刺激的B淋巴細(xì)胞的細(xì)胞核，移植到去核的能夠無限增殖的細(xì)胞中，構(gòu)成重組細(xì)胞．（假定移植后細(xì)胞核中基因的表達(dá)狀態(tài)不受影響）
②將重組細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，以獲得大量單克隆抗體．
（3）也有人提出，可以直接通過基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因（prG）來制備單克隆抗體，其思路如圖所示．
①酶A是指限制性核酸內(nèi)切酶，酶B是指DNA連接酶．
②圖中Ⅰ表示目的基因（無限增殖調(diào)控基因或prG），對(duì)Ⅱ進(jìn)行檢測(cè)與鑒定的目的檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入和是否表達(dá)，Ⅲ具有的特點(diǎn)是既能無限增殖，又能產(chǎn)生特定抗體．

Answer 1

分析 據(jù)圖分析，用酶A（限制酶）處理供體DNA分離出無限增殖調(diào)控基因，用同種限制酶切割質(zhì)粒形成相同的黏性末端，用酶B（DNA連接酶）處理形成重組質(zhì)粒，導(dǎo)入Ⅱ（效應(yīng)B細(xì)胞），形成重組細(xì)胞Ⅲ，特點(diǎn)能無限增殖，又能產(chǎn)生特定抗體．

解答 解：（1）動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)最重要的用途就是制備單克隆抗體，常用聚乙二醇、滅活的病毒、電激等誘導(dǎo)因素誘導(dǎo)細(xì)胞融合．再經(jīng)多次篩選和細(xì)胞培養(yǎng)獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞．
（2）①取特定抗原刺激的B淋巴細(xì)胞的細(xì)胞核，移植到去核的骨髓瘤細(xì)胞中，因?yàn)楣撬枇黾?xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中有無限增殖調(diào)控基因（prG），構(gòu)成重組細(xì)胞．
②將重組細(xì)胞在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，以獲得大量單克隆抗體．
（3）①圖中酶A是限制性核酸內(nèi)切酶，酶B是DNA連接酶．
②圖中Ⅰ表示目的基因（無限增殖調(diào)控基因或prG），對(duì)Ⅱ進(jìn)行檢測(cè)與鑒定的目的是檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入和是否表達(dá)，具有的特點(diǎn)是既能無限增殖，又能產(chǎn)生特定抗體．
故答案為：
（1）動(dòng)物細(xì)胞融合　滅活的病毒　 雜交瘤
（2）①特定抗原刺激的B淋巴　無限增殖　
②體外　腹腔
（3）①限制性核酸內(nèi)切酶　DNA連接酶　
②目的基因（無限增殖調(diào)控基因或prG）    檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入和是否表達(dá)　  既能無限增殖，又能產(chǎn)生特定抗體

點(diǎn)評(píng) 本題考查單克隆抗體的制備、核移植、基因工程等相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生的識(shí)記、理解能力，屬于中檔題，解題的關(guān)鍵是獲得重組細(xì)胞，特點(diǎn)是既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體．