Question

10．多聚酶鏈式反應（PCR）是一種體外迅速擴增DNA片段的技術．PCR過程一般經歷30多次下述循環(huán)：90～95℃下使模板DNA變性、解鏈→55～60℃下復性（引物與DNA模板鏈結合）→70～75℃下引物鏈延伸．下列有關PCR過程的敘述中，不正確的是（　�。�

• A． 變性過程中被切斷的是DNA分子內堿基對之間的氫鍵
• B． 延伸過程中需要DNA聚合酶、ATP、四種核糖核苷酸
• C． 復性過程中引物與DNA模板鏈的結合依靠堿基互補配對原則完成
• D． PCR與細胞內DNA復制相比所需要酶的最適溫度較高

Answer 1

分析 關于PCR技術的相關知識：
1、概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術．
2、原理：DNA復制．
3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物．
4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）．
5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開）；②低溫復性：引物結合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈．

解答 解：A、變性過程中破壞的是DNA分子內堿基對之間的氫鍵，與解旋酶的作用相同，A正確；
B、PCR技術是在較高溫度條件下進行的，該過程需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶，PCR過程不需要提供ATP，且PCR反應的產物是DNA，因此原料是四種游離的脫氧核苷酸，不是核糖核苷酸，B錯誤；
C、引物與DNA模板鏈的結合是依靠堿基互補配對原則完成的，C正確；
D、PCR技術是在較高溫度條件下進行的，因此PCR與細胞內DNA復制相比所需要酶的最適溫度較高PCR，D正確．
故選：B．

點評 本題考查PCR技術的相關知識，要求考生識記PCR技術的概念、原理、條件及具體過程等基礎知識，能與體內DNA復制進行比較，再結合所學的知識準確判斷各選項，屬于考綱識記和理解層次的考查．