Question

9．土壤中的細(xì)菌數(shù)量多、分布廣，包括自養(yǎng)細(xì)菌和異養(yǎng)細(xì)菌．自養(yǎng)細(xì)菌能直接利用光能或無(wú)機(jī)物氧化時(shí)所釋放的化學(xué)能同化CO₂合成有機(jī)物（例如硝化細(xì)菌），異養(yǎng)細(xì)菌從有機(jī)物中獲得能源和碳源（例如纖維素分解菌），人類(lèi)根據(jù)需要從土壤中分離提純各種細(xì)菌．回答下列相關(guān)問(wèn)題：
（1）培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基除了含有碳源外，還必須含有的基本成分是氮源、水、無(wú)機(jī)鹽、維生素．
（2）對(duì)培養(yǎng)基滅菌的方法是高壓蒸汽滅菌或高溫高壓滅菌．
（3）若要篩選硝化細(xì)菌，培養(yǎng)基中不應(yīng)該加入碳源，從功能上分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（4）若要鑒別所分離的細(xì)菌是否為纖維素分解菌，則應(yīng)該在培養(yǎng)基中加入剛果紅，觀察培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌．篩選獲得的菌株經(jīng)鑒定后，將優(yōu)良菌株進(jìn)行液體擴(kuò)大培養(yǎng)．培養(yǎng)時(shí)需要振蕩，其主要目的是供氧．
（5）純化菌種時(shí)，為了得到單菌落，常用的接種方法是稀釋涂布平板法和平板劃線法．
（6）細(xì)菌計(jì)數(shù)，根據(jù)培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落數(shù)目和稀釋倍數(shù)計(jì)算得出的數(shù)目往往比實(shí)際數(shù)目低，原因是兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落．

Answer 1

分析 （1）培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽．分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基．
（2）常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法．
（3）培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學(xué)消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法．
（4）選擇培養(yǎng)基的原理是：不同微生物在代謝過(guò)程中所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境不同．有的適于酸性環(huán)境，有的適于堿性環(huán)境；例如從土壤中分離放線菌時(shí)，可在培養(yǎng)基中加入10%的酚數(shù)滴，抑制細(xì)菌和真菌的生長(zhǎng)；如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽．

解答 解：（1）不同的培養(yǎng)基都含有基本成分，水、無(wú)機(jī)鹽，碳源、氮源．
（2）對(duì)培養(yǎng)基滅菌的方法是高壓蒸汽滅菌．
（3）硝化細(xì)菌能夠進(jìn)行化能合成作用合成有機(jī)物，因此若要篩選硝化細(xì)菌，培養(yǎng)基中不應(yīng)該加入碳源，從功能上分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（4）若要鑒別所分離的細(xì)菌是否為纖維素分解菌，則應(yīng)該在培養(yǎng)基中加入剛果紅，觀察培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌．篩選獲得的菌株經(jīng)鑒定后，將優(yōu)良菌株進(jìn)行液體擴(kuò)大培養(yǎng)．培養(yǎng)時(shí)需要振蕩，其主要目的是供氧．
（5）純化菌種時(shí)，為了得到單菌落，常用的接種方法是稀釋涂布平板法和平板劃線法．
（6）細(xì)菌計(jì)數(shù)，由于兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，因此根據(jù)培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落數(shù)目和稀釋倍數(shù)計(jì)算得出的數(shù)目往往比實(shí)際數(shù)目低．
故答案為：
（1）氮源、水、無(wú)機(jī)鹽、維生素
（2）高壓蒸汽滅菌或高溫高壓滅菌        
（3）碳源       選擇
（4）剛果紅     供氧  
（5）稀釋涂布平板法     平板劃線法
（6）兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落

點(diǎn)評(píng) 本題主要考查目的菌株的篩選、接種方法和培養(yǎng)基的配制注意事項(xiàng)等，意在強(qiáng)化學(xué)生對(duì)相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作的識(shí)記、理解與運(yùn)用．