Question

10．請回答與動物細胞培養(yǎng)基胚胎工程有關的問題：
（1）欲獲得牛的單個體細胞，需用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理動物組織，在體外培養(yǎng)時，通常需在培養(yǎng)液中添加動物血清、血漿等天然成分．
（2）獲取的卵子需培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期時期才能用于核移植，通過核移植獲得的動物稱為克隆動物．
（3）在胚胎分割技術中，需將牛囊胚的內細胞團均分，可利用囊胚的滋養(yǎng)層細胞進行性別鑒定．
（4）ES細胞在飼養(yǎng)層細胞上或含有抑制因子的培養(yǎng)基上培養(yǎng)時，不會發(fā)生分化；可用ES細胞分化出人造器官用于器官移植，優(yōu)點是解決供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題．

Answer 1

分析 1、動物培養(yǎng)條件：
（1）無菌無毒環(huán)境：無菌--對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行無菌處理；在細胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素．；無毒--定期更換培養(yǎng)液，防止細胞代謝產物積累對自身造成危害．
（2）營養(yǎng)：
成分：所需營養(yǎng)物質與體內基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分．
培養(yǎng)基類型：合成培養(yǎng)基（將細胞所需的營養(yǎng)物質按其種類和所需數(shù)量嚴格配制而成的培養(yǎng)基）
（3）溫度和pH值：哺乳動物多以36.5±0.5℃為宜，多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2～7.4．
（4）氣體環(huán)境：通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO₂的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)．O₂：是細胞代謝所必需的  CO₂主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．
2、胚胎干細胞
（1）胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞，來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內細胞團）．
（2）特點：具有胚胎細胞的特性，體積較小，細胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物任何一種組織細胞．另一方面，在體外培養(yǎng)條件下，ES細胞可不斷增殖而不發(fā)生分化，可進行冷凍保存，也可以進行某些遺傳改造． 
（3）胚胎干細胞的主要用途是：
①可用于研究哺乳動物個體發(fā)生和發(fā)育規(guī)律；
②是在體外條件下研究細胞分化的理想材料．ES細胞在飼養(yǎng)層細胞上或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中，能夠維持不分化的狀態(tài)．在培養(yǎng)液中加入分化誘導因子，如牛黃酸、丁酰環(huán)腺苷酸等化學物質時，就可以誘導ES細胞向分化，這為揭示細胞分化和細胞凋亡機理提供了有效的手段；
③可以用于治療人類的某些頑疾，如帕金森綜合癥、糖尿病、老年癡呆癥、肝衰竭、新衰竭、成骨不良；
④培育各種組織器官，用于器官移植，解決供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題．

解答 解：（1）欲獲得牛的單個體細胞，需用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理動物組織；在體外培養(yǎng)時，通常需在培養(yǎng)液中添加動物血清、血漿等天然成分．
（2）獲取的卵子需培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才能用于核移植，通過核移植獲得的動物稱為克隆動物．
（3）在胚胎分割技術中，需將牛囊胚的內細胞團均分，可利用囊胚的滋養(yǎng)層細胞進行性別鑒定．
（4）ES細胞在飼養(yǎng)層細胞上或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中，能夠維持不分化的狀態(tài)．ES細胞可以培育各種組織器官，用于器官移植，解決供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題．
故答案為：
（1）胰蛋白酶或膠原蛋白酶      動物血清、血漿
（2）減數(shù)第二次分裂中期       克隆動物
（3）內細胞團     滋養(yǎng)層
（4）飼養(yǎng)層細胞    解決供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題

點評 本題考查了胚胎基因工程、細胞工程、核移植技術的應用方面的知識，意在考查考生能識記并理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯(lián)系，形成一定知識網(wǎng)絡的能力，并且具有一定的分析能力和理解能力．