Question

13．某家庭擬自制酵母菌菌種釀制葡萄酒，請幫助完成釀制計劃，并分析相關(guān)問題：
（1）制菌種
步驟1：挑選白色斑點較多的葡萄，取皮加入培養(yǎng)液中，獲得提取液．
分析：葡萄上的白色斑點很可能是酵母菌菌落．
步驟2：將菌種用培養(yǎng)液擴(kuò)大培養(yǎng)．
培養(yǎng)時一般需振蕩，振蕩的目的是：增加培養(yǎng)液中溶氧量，并有利于酵母菌與營養(yǎng)物質(zhì)接觸．
分析：若要對培養(yǎng)液中的酵母菌采用血球計數(shù)板計數(shù)，方法是：先將蓋玻片放在計數(shù)室上，用吸管吸取稀釋后的培養(yǎng)液滴于其邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，在顯微鏡下計數(shù)；也可采用圖中稀釋涂布平板法的方法進(jìn)行計數(shù)．前者統(tǒng)計的是活菌加死菌，后者統(tǒng)計的是活菌．（填：活菌、死菌、活菌加死菌）

（2）挑選葡萄沖洗并晾干．
（3）破碎裝瓶：不要將瓶裝滿，要留約$\frac{1}{3}$的空間．
（4）接種并加糖發(fā)酵：所加糖量不要太多，可按照10比1的比例加糖．
分析：若所加糖量過多，會導(dǎo)致酵母菌失水死亡．
（5）過濾：約一星期后將發(fā)酵液用尼龍布反復(fù)過濾，充分去除渣滓．
（6）密封：過濾后的發(fā)酵液密封進(jìn)行后發(fā)酵，此時不是靠酵母發(fā)酵，而是進(jìn)行蘋果酸乳酸發(fā)酵，約30天后啟封．

Answer 1

分析 1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型．果酒制作的原理：
（1）在有氧條件下，反應(yīng)式如下：C₆H₁₂O₆+6H₂O+6O₂$\stackrel{酶}{→}$6CO₂+12H₂O+能量；             
（2）在無氧條件下，反應(yīng)式如下：C₆H₁₂O₆$\stackrel{酶}{→}$2CO₂+2C₂H₅OH+能量．
2、純化微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法，圖甲所示的菌種純化方法是稀釋涂布平板法，圖乙所示的菌種純化方法是平板劃線法．

解答 解：（1）葡萄皮上含有野生酵母菌，所以葡萄上的白色斑點很可能是酵母菌菌落．培養(yǎng)時一般要振蕩，振蕩的目的是增加培養(yǎng)液中溶氧量，并有利于酵母菌與營養(yǎng)物質(zhì)接觸．采用血球計數(shù)板對培養(yǎng)液中的酵母菌計數(shù)時，先將蓋玻片放在計數(shù)室上，用吸管吸取稀釋后的培養(yǎng)液滴于其邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，在顯微境下計數(shù)；也可采用圖甲所示稀釋涂布平板法．在相同條件下，采用上述兩種方法對同一培養(yǎng)液進(jìn)行計數(shù)時，在操作和計算均正確的前提下，發(fā)現(xiàn)前者計數(shù)結(jié)果明顯偏大，可能的原因是前者統(tǒng)計的是活菌和死菌的數(shù)量，后者只能統(tǒng)計活菌的數(shù)量．
（3）將葡萄汁裝人發(fā)酵瓶，要留要大約$\frac{1}{3}$的空間，目的是防止發(fā)酵液溢出．
（4）若所加糖量過多，導(dǎo)致培養(yǎng)液溶度過大，這可能會導(dǎo)致酵母菌失水過多死亡．
故答案為：
（1）酵母菌菌落      增加培養(yǎng)液中溶氧量，并有利于酵母菌與營養(yǎng)物質(zhì)接觸     蓋玻片       稀釋涂布平板法     活菌加死菌       活菌
（3）$\frac{1}{3}$      
（4）酵母菌失水死亡

點評 本題考查果酒和果醋的制作、微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記果酒和果醋制作的原理、條件等知識；識記接種微生物常用的兩種方法，掌握微生物計數(shù)的方法及注意事項，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．