Question

17．植物甲具有極強(qiáng)的耐旱性，其耐旱性與某個基因有關(guān)．若從該植物中獲得該耐旱基因，并將其轉(zhuǎn)移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性．
回答下列問題：
（1）理論上，基因組文庫含有生物的全部基因；而cDNA文庫中含有生物的部分基因．
（2）將耐旱基因?qū)�入農(nóng)桿菌，并通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將其導(dǎo)入植物乙的體細(xì)胞中，經(jīng)過一系列的過程得到再生植株．如果檢測結(jié)果呈陽性，再在田間試驗(yàn)中檢測植株的耐旱性是否得到提高．
（3）假如用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交，子代中耐旱與不耐旱植株的數(shù)量比為3：1時，則可推測該耐旱基因整合到了同源染色體的一條上（填“同源染色體的一條上”或“同源染色體的兩條上”）．
（4）耐旱基因與載體用限制酶切割后，通過DNA連接酶連接，以構(gòu)建重組表達(dá)載體．檢測目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA，可采用DNA分子雜交技術(shù)．
（5）若利用植物體細(xì)胞雜交培育優(yōu)良品種，則必須用纖維素酶和果膠酶出去雜交細(xì)胞的細(xì)胞壁，用促溶劑誘導(dǎo)融合，再進(jìn)行植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得雜交植株，所依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性．

Answer 1

分析 1、基因文庫是指將含有某種生物不同基因的許多DNA片段，導(dǎo)入到受體菌的群體中儲存，各個受體菌分別含有這種生物的不同基因．
基因組文庫包含某種生物所有的基因；部分基因文庫包含某種生物的部分基因．如：cDNA文庫．
2、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
3、目的基因的檢測與鑒定：（1）分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．（2）個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）基因組文庫含有某種生物的全部基因；cDNA文庫中只含有該種生物的部分基因．
（2）由于植物乙的耐旱性低，因此將耐旱基因?qū)�入農(nóng)桿菌，并通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將其導(dǎo)入植物乙的體細(xì)胞中，經(jīng)過一系列的過程得到再生植株．要確認(rèn)該耐旱基因是否在再生植株中正確表達(dá)，應(yīng)檢測此再生植株中該基因的表達(dá)產(chǎn)物，如果檢測結(jié)果呈陽性，再在田間試驗(yàn)中檢測植株的耐旱性是否得到提高．
（3）假如用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交，子代中耐旱與不耐旱植株的數(shù)量比為3：1時，該比例符合雜合子（Aa）自交后代的結(jié)果，則可推測該耐旱基因（A）整合到了同源染色體的一條上．
（4）耐旱基因與載體用同種限制性核酸內(nèi)切酶（或同種限制酶）切割，形成相同的黏性末端，然后再通過DNA連接酶連接，以構(gòu)建重組表達(dá)載體．檢測目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA，可采用DNA分子雜交（或核酸探針）技術(shù)．
（5）在進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交時需要使用纖維素酶和果膠酶去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，進(jìn)行植物原生質(zhì)體的融合，最終通過植物組織培養(yǎng) 技術(shù)獲得雜交植株，其原理是植物細(xì)胞的全能性．
故答案為：
（1）全部      部分   
（2）乙       耐旱性
（3）同源染色體的一條上
（4）限制酶  DNA連接酶   DNA分子雜交
（5）纖維素  果膠  植物組織培養(yǎng)   植物細(xì)胞的全能性

點(diǎn)評 本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因文庫的種類，掌握兩種基因文庫的區(qū)別；識記PCR技術(shù)的條件；識記基因工程的具體操作步驟及相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．