Question

15．克隆豬成功率較低，與早期胚胎細(xì)胞的異常凋亡有關(guān)．Bcl-2 基因是細(xì)胞凋亡抑制基因，用PCR 技術(shù)可以檢測(cè)該基因轉(zhuǎn)錄水平．克隆豬的培育及該基因轉(zhuǎn)錄水平檢測(cè)流程如圖．

請(qǐng)回答：
（1）將良種豬的組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞的過(guò)程中，一般先剪碎，然后用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理．
（2）用促性腺激素處理以獲取更多的卵母細(xì)胞，成熟的卵母細(xì)胞在核移植前需要通過(guò)顯微操作進(jìn)行去核處理．
（3）在培育克隆豬的過(guò)程中，由囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞分離獲得的胚胎干細(xì)胞（ES），在形態(tài)上具有體積小、細(xì)胞核大，核仁明顯等特點(diǎn)，要維持它們的增殖而不分化的狀態(tài)，通常在飼養(yǎng)層細(xì)胞上培養(yǎng)．
（4）通過(guò)體外受精、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等技術(shù)可以得到“試管豬”，也可以得到“試管嬰兒”．“設(shè)計(jì)試管嬰兒”技術(shù)與“試管嬰兒”技術(shù)的區(qū)別是胚胎移植之前進(jìn)行遺傳學(xué)診斷
（5）在PCR 過(guò)程中可檢測(cè)出cDNA 中Bcl-2cDNA 的分子數(shù)，進(jìn)而計(jì)算總mRNA 中Bcl-2mRNA 的分子數(shù)，從而反映出Bcl-2 基因的轉(zhuǎn)錄水平．
①圖中X 表示反轉(zhuǎn)錄過(guò)程．
②從基因組數(shù)據(jù)庫(kù)中查詢Bcl-2mRNA 的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列設(shè)計(jì)合成引物，用于PCR 擴(kuò)增．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為克隆豬的培育及該基因轉(zhuǎn)錄水平檢測(cè)流程圖，圖中采用動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)，即將良種豬體細(xì)胞核移植到去核卵細(xì)胞中形成重組細(xì)胞；早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)；胚胎移植技術(shù)．圖中X表示以mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA的過(guò)程．

解答 解：（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，首先要有胰蛋白酶或膠原蛋白酶處于動(dòng)物組織以獲得單個(gè)細(xì)胞．
（2）給良種母畜注射促性腺激素可促使其超數(shù)排卵；核移植是指將體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核卵母細(xì)胞中，因此成熟的卵母細(xì)胞在核移植前需要通過(guò)顯微操作進(jìn)行去核處理．
（3）胚胎干細(xì)胞可來(lái)自囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，其形態(tài)上的特點(diǎn)是體積小、細(xì)胞核大，核仁明顯；要維持它們的增殖而不分化的狀態(tài)，通常在飼養(yǎng)層細(xì)胞上培養(yǎng)．
（4）“試管動(dòng)物”的培育需要采用體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)．試管嬰兒技術(shù)是指通過(guò)人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過(guò)培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)．設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)是通過(guò)體外受精獲得許多胚胎，然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)．可見(jiàn)，“設(shè)計(jì)試管嬰兒”技術(shù)與“試管嬰兒”技術(shù)的區(qū)別是胚胎移植之前進(jìn)行遺傳學(xué)診斷．
（5）①由以上分析可知X表示逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程．
②從基因組數(shù)據(jù)庫(kù)中查詢Bcl-2mRNA 的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列設(shè)計(jì)合成引物，用于PCR擴(kuò)增．
故答案為：
（1）胰蛋白酶或膠原蛋白酶
（2）促性腺激素    去核
（3）內(nèi)細(xì)胞團(tuán)         體積小、細(xì)胞核大，核仁明顯      飼養(yǎng)層
（4）體外受精、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植         胚胎移植之前進(jìn)行遺傳學(xué)診斷
（5）①反轉(zhuǎn)錄    ②引物

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合克隆豬的培育過(guò)程圖，考查動(dòng)物體細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、PCR擴(kuò)增技術(shù)的應(yīng)用，要求考生識(shí)記動(dòng)物體細(xì)胞核移植的概念、原理及過(guò)程，能準(zhǔn)確判斷圖中各過(guò)程的名稱；識(shí)記PCR技術(shù)的條件，能結(jié)合題干信息答題．