Question

銅仁一中正在申報省級一類示范性高中，學(xué)校打算以學(xué)生為主體，教師協(xié)助的方式建立微生物實(shí)驗(yàn)室，以豐富學(xué)生的生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容．請回答下列問題：
（1）對微生物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行清掃和消毒處理，準(zhǔn)備微生物培養(yǎng)所需的各種原料和用具，然后從菌種站購來各種微生物菌種．對買回來的菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，首先制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基，所需的原料除了牛肉膏和蛋白胨之外還需要

 

，牛肉膏和蛋白凍的作用是

 

．將配制好的培養(yǎng)基分裝到三角瓶中，用兩層牛皮紙?jiān)�緊瓶口后置于

 

中滅菌．
（2）實(shí)驗(yàn)室中需要的微生物也可以自己培養(yǎng)，方法為：取土壤1g溶解，用相應(yīng)的培養(yǎng)基將土壤稀釋液中的微生物進(jìn)行分離純化保留菌種即可．分離純化時選用的培養(yǎng)基從功能上來說屬于

 

培養(yǎng)基．
（2）由于微生物的營養(yǎng)類型復(fù)雜，不同的微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求是不同的．如果培養(yǎng)能進(jìn)行光合作用的微生物，培養(yǎng)基中的不需要加入的是

 

源，如果培養(yǎng)能進(jìn)行固氮作用的微生物，培養(yǎng)基中的不需要加入的是

 

源．
（3）飼養(yǎng)動物常用的植物飼料中含有難溶的植酸鈣等物質(zhì)，很難被動物吸收利用，還影響對其他營養(yǎng)物質(zhì)的利用．若在飼料中添加植酸酶，則能催化其水解成為可以吸收利用的磷酸鹽等．如圖示學(xué)生們從作物根部土壤中分離產(chǎn)植酸酶的菌株的過程．

該過程中，微生物的接種方法是

 

，接種以前進(jìn)行的一系列稀釋操作，目的是在培養(yǎng)皿表面形成

 

．根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)就能大致推測出樣品中的活菌數(shù)．如果一培養(yǎng)基上有3個菌落，則1g土壤中大致的活菌數(shù)量是

 

．由于植酸鈣的不溶解性，使培養(yǎng)基形成白色渾濁．產(chǎn)植酸酶的菌株會水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區(qū)域，根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)植酸酶．實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：微生物的分離和培養(yǎng),培養(yǎng)基對微生物的選擇作用

專題：

分析：（1）培養(yǎng)基的成分一般包括水、無機(jī)鹽、碳源、氮源和生長因子．
（2）常用的滅菌方法有干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌和灼燒滅菌．
（3）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細(xì)胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體-菌落．

解答： 解：（1）培養(yǎng)基的成分一般包括水、無機(jī)鹽、碳源、氮源和生長因子，牛肉膏和蛋白胨可以提供碳源、氮源和生長因子，配置好的培養(yǎng)基應(yīng)用高壓蒸汽滅菌．
（2）培養(yǎng)基從功能來分有選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基，分離純化時選用的培養(yǎng)基從功能上來說屬于選擇培養(yǎng)基．
（3）能進(jìn)行光合作用的微生物能利用二氧化碳，故培養(yǎng)基中不加有機(jī)碳源，能進(jìn)行固氮作用的微生物，能自身固氮，培養(yǎng)基中的不需要加入的是氮源．
（4）圖示的接種方法為稀釋涂布平板法，經(jīng)過一系列稀釋操作，目的是在培養(yǎng)皿表面形成由單個細(xì)菌繁殖而來的單個菌落，據(jù)此可以推測計(jì)算原來的活菌數(shù)，也可以用于菌種的提純．1g土壤中大致的活菌數(shù)量是3÷0.1×10×10×10×100=3×10⁶個．由于根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)植酸酶，周圍有透明區(qū)域的菌落可以產(chǎn)植酸酶，由圖可以看出ACE菌落均能產(chǎn)生植酸酶，但E產(chǎn)生植酸酶的效果較好．
故答案為：（1）水、無機(jī)鹽、瓊脂    提供碳源、氮源（和生長因子）  高壓蒸汽滅菌鍋
（2）選擇
（3）碳源    氮源
（4）稀釋涂布平板法    單個菌落   3×10⁶個   ACE菌落均能產(chǎn)生植酸酶，但E產(chǎn)生植酸酶的效果較好

點(diǎn)評：本題主要考查了微生物的培養(yǎng)的相關(guān)知識，意在考查考生能識記并理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成一定知識網(wǎng)絡(luò)的能力，試題難度一般．