Question

9．已知甲種農(nóng)作物因受到乙種昆蟲危害而減產(chǎn)，乙種昆蟲食用某種原核生物分泌的丙種蛋白質(zhì)后死亡．因此，可將丙種蛋白質(zhì)基因轉入到甲種農(nóng)作物體內(nèi)，使甲種農(nóng)作物獲得抗乙種昆蟲危害的能力．回答下列問題：
（1）為了獲得丙種蛋白質(zhì)的基因，根據(jù)丙種蛋白質(zhì)的基因序列，推測出丙種蛋白質(zhì)的mRNA序列，然后按照堿基互補配對原則，推測其DNA的堿基序列；再通過化學方  法合成所需基因．
（2）構建基因表達載體時，用不同類型的限制酶切割DNA后，可能產(chǎn)生粘性末端，也可能產(chǎn)生平末端．若要在限制酶切割目的基因和質(zhì)粒后使其直接進行連接，則應選擇能使二者產(chǎn)生相同（相同、不同）粘性末端的限制酶．基因表達載體中標記基因的作用是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來．
（3）為了檢測丙種蛋白質(zhì)的基因是否轉錄出了mRNA，可用標記的丙種蛋白質(zhì)的基因片段作探針與mRNA雜交，該雜交技術稱為DNA-RNA分子雜交．
（4）將丙種蛋白質(zhì)基因通過農(nóng)桿菌轉化法導入甲種農(nóng)作物細胞，先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T-DNA 中，然后用該農(nóng)桿菌感染甲種農(nóng)作物細胞，通過DNA重組將目的基因插入植物細胞中染色體上，使目的基因的遺傳特性得意穩(wěn)定維持和表達．

Answer 1

分析 本題考生著重從目的基因的獲取和基因工程的操作工具著手解答．獲得目的基因的方法：①從基因文庫中獲取 ②利用PCR技術擴增 ③人工合成（化學合成）；DNA重組技術至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體．

解答 解：（1）在已知蛋白質(zhì)的氨基酸序列的情況下，可根據(jù)氨基酸和堿基的對應關系，推出合成該蛋白質(zhì)的mRNA序列，依據(jù)堿基互補配對原則再推出DNA的堿基序列，用DNA合成儀通過化學方法來合成目的基因．
（2）用限制酶切割DNA后，可能產(chǎn)生黏性末端，也可能產(chǎn)生平口末端．若要在限制酶基因工程中，往往采用同種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒以產(chǎn)生相同的黏性末端，再用DNA連接酶使其直接進行連接．標記基因用于鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來．
（3）為了檢測目的基因是否轉錄出了mRNA，可采用分子雜交技術，即用放射性同位素標記的胰島素基因作探針與mRNA雜交．
（4）采用農(nóng)桿菌轉化法將目的基因?qū)�入植物細胞時，先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T-DNA中，然后用該農(nóng)桿菌感染植物細胞，通過DNA重組將目的基因插入植物細胞的染色體DNA上．
故答案為：
（1）基因　堿基
（2）平 相同   鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來
（3）DNA-RNA分子雜交
（4）T-DNA 染色體

點評 本題考查基因工程中目的基因的獲取、工具酶以及目的基因的檢測等相關知識，意在考查考生的識記能力和理解能力，難度不大．