Question

4．回答下列關于微生物培養(yǎng)的問題．
高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實用性．研究者從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如圖所示．

（1）①過程稱為稀釋，②過程是為了篩選獲得單個菌落．在Ⅰ號培養(yǎng)基上挑出能產(chǎn)生淀粉酶的嗜熱菌菌落的鑒別方法是培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的透明圈．
（2）按功能分，Ⅰ號培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基；該培養(yǎng)基中必須添加的成分有ACD（多選）等．
A．瓊脂   B．葡萄糖   C．硝酸銨   D．淀粉
（3）一般對配制的培養(yǎng)基采用高壓滅菌，其中“高壓”是為了殺死培養(yǎng)基中的細菌芽孢．
（4）研究者在分離得到了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌后，將其和一種土壤中分離得到的淀粉降解細菌進行了對抗生素敏感性的比較培養(yǎng)，結果如圖2，可以判斷是嗜熱菌的可能是①和④ （用圖2中編號）．以下是你做出判斷的依據(jù)是嗜熱菌BCF（多選）
A．轉錄受利福平抑制B．轉錄不受利福平抑制
C．細胞壁合成不受青霉素干擾D．細胞壁合成受青霉素干擾
E．蛋白質(zhì)耐高溫F．生活在極端環(huán)境中
（5）如果高溫淀粉酶的產(chǎn)業(yè)化需要其活性在固定化處理時不受損失，且在多次重復使用后仍能維持穩(wěn)定的酶活性，則應選擇圖3中的C固定化工藝．

Answer 1

分析 1、篩選與分離微生物的接種方法主要是稀釋涂布平板法和平板劃線法．
2、培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基按功能分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基，其成分主要有碳源、氮源水和無機鹽等．
3、制備培養(yǎng)基的一般步驟：計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板．
4、利福平的作用機理是通過抑制了依賴DNA的RNA聚合酶，使此酶失去活性，從而影響了細菌的RNA合成，起到抑菌和殺菌作用；青霉素藥理作用是干擾細菌細胞壁的合成．
5、分析題圖：圖1是用稀釋涂布平板法分離高溫淀粉酶的嗜熱菌的過程，其中①過程是梯度稀釋，②過程是用稀釋涂布平板法進行接種的過程；圖2中的①對青霉素不敏感，②對青霉素敏感，③對利福平敏感，④對利福平不敏感；圖3是固定化酶和固定化細胞技術，其中A是物理吸附法，B是化學結合法，C是包埋法．

解答 解：（1）由以上分析知，①過程稱為稀釋，②過程是用稀釋涂布平板法進行接種的過程，是為了篩選獲得單個菌落；嗜熱菌生長時可釋放淀粉酶分解培養(yǎng)基中的淀粉，形成大小不同的透明圈，所以在Ⅰ號培養(yǎng)基上應選擇具有以該菌的菌落為中心的透明圈的作為能產(chǎn)生淀粉酶的嗜熱菌菌落．
（2）只有產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌才能在Ⅰ號培養(yǎng)基上正常生存，所以Ⅰ號培養(yǎng)基稱選擇培養(yǎng)基；該選擇培養(yǎng)基在配制時要加入瓊脂作為凝固劑，還要添加硝酸銨提供氮源，加入淀粉為位于碳源．
（3）對配制的培養(yǎng)基采用高壓滅菌中的“高壓”是為了殺死培養(yǎng)基中的細菌芽孢．
（4）與土壤中分離得到的淀粉降解細菌相比較，從熱泉中篩選的高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌對抗生素和利福平均不敏感，因此圖2中的①和④可能是嗜熱菌；因為嗜熱菌生活在極端環(huán)境中，轉錄不受利福平抑制，細胞壁的合成也不受青霉素干擾．
（5）如果高溫淀粉酶的產(chǎn)業(yè)化需要其活性在固定化處理時不受損失，且在多次重復使用后仍能維持穩(wěn)定的酶活性，則應選擇包埋法的固定工藝，即圖3中的C．
故答案為：
（1）稀釋    篩選獲得單個菌落   透明圈
（2）選擇培養(yǎng)基    ACD
（3）殺死培養(yǎng)基中的細菌芽孢
（4）①和④BCF
（5）C

點評 本題考查微生物選擇培養(yǎng)、利用等相關知識，意在考查學生從材料中獲取相關的生物學信息，并能運用這些信息，結合所學知識解決相關的生物學問題．