Question

18．根據(jù)所學(xué)知識(shí)，請(qǐng)回答下列有關(guān)問題：
（1）科學(xué)家利用基因工程手段培育抗干旱的轉(zhuǎn)基因煙草．獲得大量抗干旱基因可用RCR技術(shù)來擴(kuò)增，需要用到的酶有熱穩(wěn)定的DNA聚合酶（Taq酶）．在培育轉(zhuǎn)基因抗干旱煙草過程中，常需將重組質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌，該操作過程中首先必須用Ca²⁺處理土壤農(nóng)桿菌，使土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)變?yōu)楦惺軕B(tài)；然后將重組質(zhì)粒和感受態(tài)細(xì)胞在緩沖液中混合培養(yǎng)完成轉(zhuǎn)化過程．
（2）EK細(xì)胞來源于囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞或胎兒的原始性腺，也可以通過核移植技術(shù)得到重組細(xì)胞后再進(jìn)行相應(yīng)處理獲得．通過對(duì)患者的EK細(xì)胞進(jìn)行體外誘導(dǎo)分化，可培育出人造組織器官，進(jìn)而解決免疫排斥問題．
（3）通常采用DNA分子雜交技術(shù)來檢測(cè)抗性基因是否插入了甘藍(lán)基因組．抗性基因在甘藍(lán)細(xì)胞中表達(dá)時(shí)是遵循中心法則的，請(qǐng)用箭頭和文字寫出基因表達(dá)的過程中遺傳信息在不同分子之間的流動(dòng)情況DNA→RNA→蛋白質(zhì)．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）獲得大量抗干旱基因可用PCR技術(shù)來擴(kuò)增，PCR技術(shù)需要熱穩(wěn)定的DNA聚合酶（Taq酶）．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞時(shí)，一般采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，即常需將重組質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌，該過程中首先必須用Ca²⁺處理土壤農(nóng)桿菌，使土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)變?yōu)楦惺軕B(tài)；然后將重組質(zhì)粒和感受態(tài)細(xì)胞在緩沖液中混合培養(yǎng)完成轉(zhuǎn)化過程．
（2）EK細(xì)胞來源于囊胚期內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的細(xì)胞或胎兒的原始性腺，也可以通過核移植技術(shù)得到重組細(xì)胞后再進(jìn)行相應(yīng)處理獲得．通過對(duì)患者的EK細(xì)胞進(jìn)行體外誘導(dǎo)分化，可培育出人造組織器官，進(jìn)而解決免疫排斥問題．
（3）通常采用DNA分子雜交技術(shù)來檢測(cè)抗性基因是否插入了甘藍(lán)基因組．抗性基因在甘藍(lán)細(xì)胞中表達(dá)時(shí)是遵循中心法則的，基因表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)步驟，因此遺傳信息在不同分子之間的流動(dòng)情況為DNA→RNA→蛋白質(zhì)．
故答案為：
（1）熱穩(wěn)定的DNA聚合酶（Taq酶）  Ca²⁺處理土壤農(nóng)桿菌，使土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)變?yōu)楦惺軕B(tài)    重組質(zhì)粒和感受態(tài)細(xì)胞
（2）內(nèi)細(xì)胞團(tuán)    核移植    體外誘導(dǎo)分化
（3）DNA分子雜交   DNA→RNA→蛋白質(zhì)

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理、操作步驟等，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題．