Question

14．人類疾病的轉(zhuǎn)基因動物模型常用于致病機理的探討及治療藥物的篩選．利用正常大鼠制備遺傳性高血壓轉(zhuǎn)基因模型大鼠的流程如圖所示．

（1）卵母細胞除從活體輸卵管中采集外，還可從已處死的雌鼠卵巢中獲�。�
（2）選用卵母細胞做轉(zhuǎn)基因受體細胞的優(yōu)點是能進行一步完成減數(shù)分裂．
（3）圖中的高血壓相關(guān)基因作為目的基因，質(zhì)粒作為載體，二者需用同種限制酶切割后連接成重組載體，該過程與質(zhì)粒上含有限制酶識別位點有關(guān)．
（4）子代大鼠如果檢測到相應(yīng)蛋白質(zhì)和表現(xiàn)高血壓癥狀，即可分別在分子水平和個體水平上說明高血壓相關(guān)基因已成功表達，然后可用其建立高血壓轉(zhuǎn)基因動物模型．
（5）在上述轉(zhuǎn)基因大鼠的培育過程中，所用到的主要胚胎工程技術(shù)是體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植．

Answer 1

分析 根據(jù)題意和圖示分析可知：圖示是利用正常大鼠制備遺傳性高血壓轉(zhuǎn)基因模型大鼠的流程圖．首先將目的基因與表達載體連接形成重組質(zhì)粒，再導(dǎo)入受精卵，進行早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植，最終獲得轉(zhuǎn)基因大鼠．

解答 解：（1）卵母細胞的采集和培養(yǎng)，主要方法是：用促性腺激素處理，使其超數(shù)排卵，然后，從輸卵管中沖取卵子，直接與獲能的精子體外受精．第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細胞；第三種方法：是直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細胞，叫活體采卵．采集的卵母細胞，都要在體外經(jīng)人工培養(yǎng)成熟后，才能與獲能的精子受精．
（2）處于MⅡ中期的卵母細胞受精后能完成減數(shù)分裂，并形成受精卵，發(fā)育成早期胚胎．
（3）圖中高血壓相關(guān)基因是目的基因，應(yīng)從高血壓患者體細胞獲得．質(zhì)粒和目的基因結(jié)合形成重組質(zhì)粒或基因表達載體．基因表達載體的組成：目的基因+啟動子+終止子+標(biāo)記基因．其中啟動子是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，終止子位于基因的尾端．
（4）子代大鼠如果檢測出與高血壓有關(guān)的蛋白質(zhì)和表現(xiàn)高血壓癥狀，說明高血壓基因已經(jīng)成功表達．
（5）在上述轉(zhuǎn)基因大鼠的培育過程中，所用到工程技術(shù)主要是基因工程、胚胎工程（體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植．
故答案為：
（1）活體輸卵管
（2）能進行一步完成減數(shù)分裂
（3）目的基因    載體  同種限制酶      限制酶識別位點
（4）檢測到相應(yīng)蛋白質(zhì)     表現(xiàn)高血壓癥狀
（5）體外受精    早期胚胎培養(yǎng)    胚胎移植

點評 本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因大鼠的培育過程圖，考查基因工程的原理及技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)及胚胎移植等知識，重點考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作過程，能結(jié)合圖中信息答題．