Question

7．口蹄疫是由RNA病毒引起的一種偶蹄動(dòng)物傳染�。�科學(xué)家嘗試?yán)�用轉(zhuǎn)基因番茄生產(chǎn)口蹄疫疫苗（其主要成分是該病毒的一種結(jié)構(gòu)蛋白VPl），過(guò)程如圖所示．請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

（1）圖示②成功構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程中，需要用到的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶．
（2）圖示⑤⑥代表的過(guò)程分別是脫分化、再分化．
（3）若要檢測(cè)轉(zhuǎn)化成功的番茄植株，除檢測(cè)標(biāo)記基因的產(chǎn)物外，還可采用分子雜交技術(shù)，檢測(cè)目的基因在番茄體內(nèi)是否轉(zhuǎn)錄．
（4）圖示⑤⑥⑦代表的過(guò)程所涉及的生物工程技術(shù)是植物細(xì)胞工程（或植物組織培養(yǎng)）．
（5）在該過(guò)程中，研究人員首先獲取了目的基因，并采用PCR技術(shù)，對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增．該技術(shù)需要的條件是：引物、酶、原料和模板；然后構(gòu)建基因表達(dá)載體．基因表達(dá)載體中，除了具有目的基因、啟動(dòng)子、終止子及復(fù)制原點(diǎn)之外，還需具有標(biāo)記基因．
（6）圖中將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．

Answer 1

分析 圖示表示利用轉(zhuǎn)基因番茄來(lái)生產(chǎn)口蹄疫疫苗，而口蹄疫病毒的遺傳物質(zhì)為RNA，因此要獲得目的基因必須使用逆轉(zhuǎn)錄的方法獲得．
①表示目的基因的獲取、②表示目的基因與運(yùn)載體重組、③表示目的基因?qū)�入農(nóng)桿菌、④表示利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、⑤⑥⑦表示利用植物的組織培養(yǎng)技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因植株．

解答 解：（1）圖示②成功構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程中，首先需要利用同種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，然后利用DNA連接酶將質(zhì)粒和目的基因之間的黏性末端進(jìn)行連接．
（2）圖中⑤⑥⑦表示利用植物的組織培養(yǎng)技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因植株的過(guò)程，⑤表示脫分化形成愈傷組織，⑥表示再分化形成番茄幼苗．
（3）若要檢測(cè)轉(zhuǎn)化成功的番茄植株，除檢測(cè)標(biāo)記基因的產(chǎn)物外，還可采用分子雜交技術(shù)，檢測(cè)目的基因在番茄體內(nèi)是否轉(zhuǎn)錄．
（4）圖示⑤⑥⑦過(guò)程表示植物組織培養(yǎng)，該技術(shù)屬于植物細(xì)胞工程的范疇．
（5）在該過(guò)程中，研究人員首先獲取了目的基因，并采用PCR技術(shù)，對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增．該技術(shù)需要的條件是：引物、酶、原料和模板；然后構(gòu)建基因表達(dá)載體．基因表達(dá)載體中，除了具有目的基因、啟動(dòng)子、終止子及復(fù)制原點(diǎn)之外，還需具有標(biāo)記基因．
（6）圖中將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法是 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．
故答案為：
（1）限制性核酸內(nèi)切酶   DNA連接酶　
（2）脫分化  再分化　
（3）分子雜交　
（4）植物細(xì)胞工程（或植物組織培養(yǎng)）　
（5）模板　標(biāo)記基因　
（6）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法

點(diǎn)評(píng) 本題難度適中，具有一定的綜合性，考查了基因工程、植物組織培養(yǎng)技術(shù)等知識(shí)，要求考生具有一定的識(shí)圖能力、識(shí)記能力、知識(shí)的遷移能力．考生要識(shí)記PCR技術(shù)的原理以及需要的條件，識(shí)記植物組織培養(yǎng)的過(guò)程以及愈傷組織的特點(diǎn)，識(shí)記基因工程的原理等．