Question

15．通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)入法培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因植物的過程如圖（圖中①〜④表示相應(yīng)操作過程）．請回答：

（1）如果外源基因的核苷酸序列是未知的，可以建立一個(gè)包括外源基因來源生物中所有基因的基因文庫來獲取外源基因．圖中②過程涉及的工具酶是DNA連接酶．
（2）將外源遺傳物質(zhì)與受體植物細(xì)胞（包括原生質(zhì)體受體）遺傳物質(zhì)重新組合，除了轉(zhuǎn)基因技術(shù)外，還有
細(xì)胞融合或顯微注射等方法，這些方法解決了傳統(tǒng)育種方法存在的遠(yuǎn)緣親本難以雜交（或生殖隔離）的缺陷．植物原生質(zhì)體的獲取可以在較高滲透壓環(huán)境下，用纖維素酶和果膠酶處理根尖、葉片、愈傷組織或懸浮培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞壁．
（3）如果構(gòu)建重組細(xì)胞的目的是為了獲取重要的次生代謝產(chǎn)物（如某些中藥），可以通過大量培養(yǎng)特定細(xì)胞系來達(dá)成目的．
（4）如果農(nóng)桿菌侵染對象為某植物葉片，將被侵染的葉片除菌后進(jìn)行培養(yǎng)，最終得到轉(zhuǎn)基因植物．下列敘述中TH確的是D．
A．愈傷組織在合適條件下經(jīng)脫分化形成再生植株
B．再生的芽在細(xì)胞分裂素含量較高的培養(yǎng)基上生根
C．葉片在含合適濃度生長素的培養(yǎng)基上經(jīng)再分化形成愈傷組織
D．愈傷組織在細(xì)胞分裂素和生長素配比較髙的培養(yǎng)基上形成芽．

Answer 1

分析 分析題圖：①表示從農(nóng)桿菌中獲取Ti質(zhì)粒，②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，③表示將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞，④表示植物組織培養(yǎng)．

解答 解：（1）獲得目的基因的方法：①從基因文庫中獲��；②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增；③人工合成（化學(xué)合成）．其中采用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成法都適用于目的基因序列已知的情況下，如果外源基因的核苷酸序列是未知的，則應(yīng)該從基因文庫中獲取，即可以建立一個(gè)包括外源基因來源生物中所有基因的基因文庫來獲取外源基因．圖中②表示目的基因與運(yùn)載體連接形成重組質(zhì)粒，該過程涉及的工具酶是DNA連接酶．
（2）將外源遺傳物質(zhì)與受體植物細(xì)胞（包括原生質(zhì)體受體）遺傳物質(zhì)重新組合，除了轉(zhuǎn)基因技術(shù)外，還有細(xì)胞融合或顯微注射等方法，這些方法解決了傳統(tǒng)育種方法存在的遠(yuǎn)緣親本難以雜交（或生殖隔離）的缺陷．植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，根據(jù)酶的專一性原理去除植物細(xì)胞壁應(yīng)該用纖維素酶和果膠酶．
（3）如果構(gòu)建重組細(xì)胞的目的是為了獲取重要的次生代謝產(chǎn)物（如某些中藥），可以通過大量培養(yǎng)特定細(xì)胞系來達(dá)成目的．
（4）A．愈傷組織在合適條件下經(jīng)再分化形成再生植株，A錯(cuò)誤；
B．再生的芽在細(xì)胞分裂素含量較高的培養(yǎng)基上發(fā)芽，在生長素含量較高的培養(yǎng)基上生根，B錯(cuò)誤；
C．葉片在含合適濃度生長素的培養(yǎng)基上經(jīng)脫分化形成愈傷組織，C錯(cuò)誤；
D．愈傷組織在細(xì)胞分裂素和生長素配比較髙的培養(yǎng)基上形成芽，D正確．
故選：D．
故答案為：
（1）基因文庫  DNA連接酶
（2）細(xì)胞融合或顯微注射      遠(yuǎn)緣親本難以雜交（或生殖隔離）    纖維素酶和果膠
（3）細(xì)胞系   
（4）D

點(diǎn)評 本題結(jié)合圖解，考查基因工程和細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)；識(shí)記植物細(xì)胞工程的相關(guān)技術(shù)及其應(yīng)用，能正確分析題圖，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．