Question

下圖是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應器的技術路線。圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因，ampR表示氨芐青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直線所示為三種限制酶的酶切位點。

據圖回答：

(1)圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用________限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因。篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含________的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，然后再在含________的培養(yǎng)基上進行。

(2)能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細胞中特異性表達的調控序列是________(填字母代號)。

A．啟動子　　　　　　　　　B．tetR

C．復制原點 D．ampR

(3)過程①可采用的操作方法是________(填字母代號)。

A．農桿菌轉化 B．大腸桿菌轉化

C．顯微注射 D．細胞融合

(4)對早期胚胎進行切割，經過程②可獲得多個新個體。這利用了細胞的________性。

(5)為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達，可采用________(填字母代號)技術。

A．核酸分子雜交 B．基因序列分析

C．抗原—抗體雜交 D．PCR

 

Answer 1

(1)HindⅢ和BamHⅠ　氨芐青霉素 四環(huán)素

(2)A　(3)C　(4)

(5)全能　(6)C

【解析】

試題分析：

（1）由圖可知目的基因和質粒上都有BamHI和HindIII酶切位點，因此應用它們切割，切割后需要將目的基因和運載體用DNA連接酶進行連接；因為該質粒上有抗氨芐青霉素的抗性標記基因，四環(huán)素抗性基因被破壞，因此應先放在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，然后放在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，以便篩選。

（2）基因的表達主要是轉錄和翻譯，啟動子是驅動基因進行轉錄的，故應是A。

（3）農桿菌轉化法是將重組載體導入到植物中常用的方法，故A錯誤；大腸桿菌轉化法是導入到微生物細胞常用的方法，故B錯誤；因為是要導入到動物細胞中，故最常用顯微注射法，故C正確；細胞融合技術不能把外源基因導入受體細胞中。

（4）早期胚胎分割后能得到多個基因型相同的個體，利用了細胞的全能性。

（5）檢測蛋白是否表達，也就是檢測目的基因表達產物蛋白質，可以用抗原抗體雜交的方法，故C正確。

考點：本題考查基因工程的有關知識，意在考查考生識圖能力和理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯(lián)系的能力。