Question

8．某重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室課題研究組欲將一株野生雜草的抗病基因轉(zhuǎn)給一雙子葉農(nóng)作物．該農(nóng)作物含有高莖基因，植株過高容易倒伏，科學(xué)家欲通過基因工程操作抑制高莖基因的表達(dá)．結(jié)合所學(xué)知識分析下列問題：
（1）課題研究組已經(jīng)獲得了抗性基因，欲體外大量擴(kuò)增該目的基因需采用PCR技術(shù)，該技術(shù)的基本反應(yīng)過程：目的基因受熱變性后解鏈為單鏈，引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合，然后在Taq熱穩(wěn)定性DNA聚合酶的作用下進(jìn)行延伸．
（2）該基因工程操作的核心是基因表達(dá)載體的構(gòu)建．本研究中，欲將目的基因轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞，常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．科學(xué)家將高莖基因的反義基因轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞，該基因產(chǎn)生的mRNA能夠與高莖基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA互補(bǔ)結(jié)合，形成雙鏈RNA，抑制高莖基因的表達(dá)．

Answer 1

分析 1、PCR技術(shù)的操作過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈．
2、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．

解答 解：（1）體外擴(kuò)增目的基因可采用PCR技術(shù)，其過程為：目的基因受熱變性后解鏈為單鏈，引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合形成局部雙鏈，然后在Taq熱穩(wěn)定性DNA聚合酶的作用下進(jìn)行延伸．
（2）基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建．將目的基因轉(zhuǎn)入植物細(xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．反義基因產(chǎn)生的mRNA能夠與高莖基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA互補(bǔ)結(jié)合，形成雙鏈RNA，抑制基因表達(dá)的翻譯過程．
故答案為：
（1）PCR    變性   引物    Taq熱穩(wěn)定性   延伸
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建   農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化
（3）反義   雙鏈RNA

點(diǎn)評 本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記PCR技術(shù)的概念、原理、條件及過程；識記基因工程的操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．