Question

3．通過基因工程的方法，科學(xué)家采用花粉管通道法將毒蛋白基因轉(zhuǎn)入棉花植株并獲得成功表達(dá)．棉鈴蟲吃了這種轉(zhuǎn)基因棉花的植株后就會死亡．花粉管通道法是指：利用植物花粉萌發(fā)時(shí)形成的花粉管通道將毒蛋白基因送入胚囊，進(jìn)而導(dǎo)入尚不具備細(xì)胞壁的合子或早期胚體細(xì)胞中，借助天然的種胚系統(tǒng)，形成含有目的基因的種胚．請回答下列問題：
（1）下列所示的黏性末端是由4種限制性核酸內(nèi)切酶作用產(chǎn)生的．
（2）利用花粉管通道法將毒蛋白基因?qū)�入棉花�?xì)胞，此過程是基因工程操作步驟中的第三步，即將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞．獲取目的基因時(shí)，如果基因比較小，核苷酸序列又已知，則可以通過DNA合成儀用化學(xué)方法直接人工合成．
（3）該目的基因在導(dǎo)入受體細(xì)胞前需要與載體結(jié)合，目前經(jīng)常使用的載體是質(zhì)粒．
（4）基因工程操作的第四步是目的基因的檢測與鑒定，其中分子水平的檢測又分三步：首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因，采用的技術(shù)是DNA分子雜交技術(shù)；其次還要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)出了mRNA，方法同樣是采用分子雜交技術(shù)；最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是抗原-抗體雜交．

Answer 1

分析 基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲��；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；④目的基因的檢測與鑒定．

解答 解：（1）一種限制酶只能識別一種核苷酸序列，所以圖中的四種粘性末端是由四種限制酶切割形成的．
（2）基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲��；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；④目的基因的檢測與鑒定．其中目的基因的導(dǎo)入屬于第三步；在獲取目的基因時(shí)，如果目的基因太小，核苷酸序列又已知，則不適合直接獲取，可以通過DNA合成儀人工合成．
（3）基因工程中最常用的運(yùn)載體是質(zhì)粒，可以將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞．
（4）DNA上是否插入了目的基因的檢測方法是DNA分子雜交技術(shù)；目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA的檢測方法是分子雜交技術(shù)；目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)的檢測方法是抗原--抗體雜交技術(shù)．
故答案為：
（1）4　   
（2）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞    　人工合成　   
（3）質(zhì)粒 　   
（4）DNA分子雜交技術(shù)     　目的基因是否轉(zhuǎn)出了mRNA    　目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)　   抗原-抗體

點(diǎn)評 本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作步驟，掌握各步驟中應(yīng)注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合圖中信息答題．