Question

4．如圖表示培育轉(zhuǎn)熒光蛋白基因克隆豬的流程，請回答有關(guān)問題：

（1）過程①用到的工具酶有限制酶，DNA連接酶．
（2）過程②最常用的方法是顯微注射法．
（3）該培育流程中涉及到的細(xì)胞工程技術(shù)有動物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞核移植．
（4）若要同時(shí)獲得多頭轉(zhuǎn)熒光蛋白基因克隆豬，可在桑椹胚或囊胚期進(jìn)行胚胎分割然后移植，進(jìn)行該過程時(shí)應(yīng)注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割．
（5）第一代轉(zhuǎn)熒光蛋白基因克隆豬體細(xì)胞中只含一個(gè)熒光蛋白基因．理論上它們的后代中，能發(fā)出熒光的個(gè)體占總數(shù)的$\frac{3}{4}$．

Answer 1

分析 分析圖解，可以看出該熒光克隆豬涉及了多項(xiàng)生物工程技術(shù)，包括基因工程、動物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)．圖中①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，②表示目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，③表示利用核移植技術(shù)構(gòu)建重組細(xì)胞，④表示早期胚胎培養(yǎng)，⑤表示胚胎移植．

解答 解：（1）過程①表示表示基因工程中的基因表達(dá)載體的構(gòu)建，該過程中需要用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶．
（2）目的基因?qū)�入動物�?xì)胞的方法一般為顯微注射法．
（3）上述過程中，導(dǎo)入目的基因的豬胎兒成纖維細(xì)胞要經(jīng)過動物細(xì)胞培養(yǎng)篩選出轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞，然后該細(xì)胞的細(xì)胞核與去核卵細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞核移植獲得重組細(xì)胞，重組細(xì)胞經(jīng)過早期胚胎培養(yǎng)到桑葚胚或囊胚期，最后經(jīng)過胚胎移植技術(shù)將早期胚胎移植到代孕母豬子宮內(nèi)，最后生成熒光克隆豬．其中涉及到的細(xì)胞水平現(xiàn)代生物技術(shù)主要有動物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞核移植．
（4）進(jìn)行胚胎分割時(shí)，應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚．如果對囊胚進(jìn)行分割時(shí)，應(yīng)對內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則會影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育．
（5）第一代轉(zhuǎn)熒光蛋白基因克隆豬體細(xì)胞中只含一個(gè)熒光蛋白基因，可以把該豬看成是Aa雜合子，該雜合子自交時(shí)，AA+Aa基因型的個(gè)體占全部后代的$\frac{3}{4}$．
故答案為：
（1）限制酶   DNA連接酶
（2）顯微注射法
（3）動物細(xì)胞培養(yǎng)  細(xì)胞核移植
（4）桑椹胚或囊胚    內(nèi)細(xì)胞團(tuán)
（5）$\frac{3}{4}$

點(diǎn)評 本題結(jié)合圖解，考查基因工程、細(xì)胞工程和胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的操作工具及操作步驟中，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)；識記動物細(xì)胞工程的相關(guān)技術(shù)及其應(yīng)用；識記胚胎工程的相關(guān)技術(shù)及其應(yīng)用，能正確分析題圖，再結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．