Question

(15分)苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株，篩選的主要步驟如下圖所示，①為土壤樣品。請回答下列問題。

(1)②中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入________作為碳源，②中不同濃度碳源的培養(yǎng)基________(A.影響；B.不影響)細(xì)菌的數(shù)量，如果要測定②中活細(xì)菌數(shù)量，常采用________法。

(2)④為對照，微生物在④中不生長，在⑤中生長，④與⑤培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于________；使用________法可以在⑥上獲得單菌落。

采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時為什么進(jìn)行倒置培養(yǎng)？ ______________________。

(3)如何比較不同菌株降解苯酚能力的大�。縚_________________________。

(4)實(shí)驗(yàn)過程中如何防止其他微生物的污染？__________________________。

 

Answer 1

(1)苯酚 A 稀釋平板計(jì)數(shù)(或活菌計(jì)數(shù)或菌落計(jì)數(shù))

(2)④含除苯酚外的其他碳源，⑤以苯酚為唯一碳源 平板分離(或稀釋涂布平板或平板劃線分離) 避免培養(yǎng)過程產(chǎn)生的水分影響微生物的生長

(3)用同樣苯酚濃度的培養(yǎng)液培養(yǎng)不同菌株，一定時間后，通過測定接種了不同菌株的培養(yǎng)液中的pH來測定培養(yǎng)液中苯酚含量

(4)培養(yǎng)基滅菌，接種環(huán)境滅菌，接種過程無菌操作

【解析】考查微生物的分離、培養(yǎng)、數(shù)量測定、無菌操作等基本技術(shù)。(1)依題意可知，研究人員要從土壤中篩選獲得只能利用苯酚的細(xì)菌菌株，苯酚應(yīng)是這些細(xì)菌的碳源，所以培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源；苯酚作為唯一碳源，它的濃度將影響培養(yǎng)基中細(xì)菌的數(shù)量；稀釋平板計(jì)數(shù)(活菌計(jì)數(shù)或菌落計(jì)數(shù))法是常用來統(tǒng)計(jì)樣品中活菌數(shù)目的方法。(2)從題圖中可以看出，微生物在④中不生長，而在⑤中能夠生長，說明④中缺乏微生物生長的必要條件，因?yàn)楸緦?shí)驗(yàn)是為了篩選能降解苯酚的細(xì)菌菌株，因此可推斷④含除苯酚外的其他碳源，⑤以苯酚為唯一碳源；若在⑥上獲得單菌落，最常用的方法是平板分離(稀釋涂布平板或平板劃線分離)；采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時要倒置培養(yǎng)，以防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上影響微生物的生長。(3)苯酚顯酸性，不同菌株降解苯酚的能力不同，故用同樣苯酚濃度的培養(yǎng)液培養(yǎng)不同菌株，一定時間后，測定接種了不同菌株的培養(yǎng)液中的pH，則能比較不同菌株降解苯酚能力的大小。(4)實(shí)驗(yàn)過程中，從制備培養(yǎng)基到接種與培養(yǎng)等全部實(shí)驗(yàn)過程都要無菌操作，如培養(yǎng)器皿及培養(yǎng)基的滅菌，接種環(huán)境滅菌，接種過程要注意無菌操作等。