Question

7．地球上植物產(chǎn)生的纖維素中有40%～60%被土壤中的某些微生物利用，從土壤中分離并研究這些微生物有利于人們更有效地利用植物秸稈中的纖維素．請(qǐng)回答：
（1）分離纖維素分解菌，宜從富含纖維素的土壤中取樣．纖維素分解菌之所以能夠利用纖維素，是因?yàn)槠浼?xì)胞內(nèi)含有纖維素酶．
（2）培養(yǎng)基應(yīng)該以纖維素作為唯一碳源．除了碳源，培養(yǎng)基還應(yīng)該含有氮源、水和無(wú)機(jī)鹽等．對(duì)配制好的培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌．
（3）纖維素分解菌純化培養(yǎng)中常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法．在添加剛果紅的培養(yǎng)基上，可通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌．
（4）經(jīng)提取可獲得纖維素分解菌的各種蛋白質(zhì)，要從這些蛋白質(zhì)中分離出纖維素酶，可采用的方法有凝膠色譜法和電泳法．如果采用包埋法對(duì)該細(xì)菌進(jìn)行固定，也可不經(jīng)過(guò)酶的提取和分離等操作即可實(shí)現(xiàn)纖維素發(fā)酵．

Answer 1

分析 1、從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株．
2、微生物常見(jiàn)的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．
3、消毒和滅菌

	消毒	滅菌
概念	使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法	灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌
適用對(duì)象	操作空間、某些液體、雙手等	接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等

解答 解：（1）分離纖維素分解菌，宜從富含纖維素的土壤中取樣．纖維素分解菌之所以能夠利用纖維素，是因?yàn)槠浼?xì)胞內(nèi)含有纖維素酶，能將纖維素水解成葡萄糖．
（2）要從土壤中分離出能分解纖維素的微生物，所用的培養(yǎng)基應(yīng)該以纖維素為唯一碳源；培養(yǎng)基中除含有碳源，還應(yīng)該有氮源、水和多種無(wú)機(jī)鹽等．對(duì)培養(yǎng)基常采用高壓蒸汽滅菌法滅菌，目的是殺死細(xì)菌的芽孢，防止雜菌污染．
（3）纖維素分解菌純化培養(yǎng)中常用的接種方法的稀釋涂布平板法或平板劃線法．在添加剛果紅的培養(yǎng)基上，纖維素被分解后，剛果紅-纖維素復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈．因此，可通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌．
（4）纖維素酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，從纖維素分解菌中提取纖維素酶，可采用凝膠色譜法和電泳法；如果采用包埋法對(duì)該細(xì)胞菌進(jìn)行固定，也可不經(jīng)過(guò)酶的提取和分離等繁操作即可實(shí)現(xiàn)纖維素發(fā)酵．
故答案為：
（1）富含纖維素        纖維素酶
（2）纖維素          氮源、水和無(wú)機(jī)鹽              高壓蒸汽滅菌
（3）平板劃線法和稀釋涂布平板法    透明圈
（4）凝膠色譜法和電泳法      包埋

點(diǎn)評(píng) 本題主要考查纖維素分解菌的篩選、鑒定和無(wú)菌操作的相關(guān)內(nèi)容，意在提高學(xué)生無(wú)菌操作意識(shí)與加深相關(guān)知識(shí)點(diǎn)的識(shí)記與理解．