Question

20．根據(jù)所學(xué)生物學(xué)知識回答下列問題：
（1）目前臨床上使用的紅細(xì)胞生成素（一種糖蛋白，用于治療腎衰性貧血）主要來自基因工程技術(shù)生產(chǎn)的重組人紅細(xì)胞生成素（rhEPO）．檢測rhEPO的體外活性需用抗rhEPO的單克隆抗體．分泌該單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，可由rhEPO免疫過的小鼠B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合而成，在融合過程中至少需要進(jìn)行2次篩選．
（2）在“試管�！钡呐嘤�過程中，采用激素處理可使良種母牛一次排出多枚卵母細(xì)胞，最常用的激素是促性腺激素．從良種公牛采集的精子需獲能后才能進(jìn)行受精作用；防止多精入卵的兩道屏障依次為透明帶反應(yīng)、卵黃膜封閉作用
（3）生態(tài)系統(tǒng)內(nèi)即使某個物種由于某種原因而死亡，也會很快有其他物種占據(jù)它原來的生態(tài)位置，從而避免系統(tǒng)結(jié)構(gòu)或功能失衡．這體現(xiàn)了生態(tài)工程的什么原理B
A．協(xié)調(diào)與平衡原理      B．物種多樣性原理      C．物質(zhì)循環(huán)再生原理      D．整體性原理
（4）農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)基因需要利用農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒完成，圖1是Ti質(zhì)粒的具體組成．（T-DNA區(qū)大小約17kb）

①若將圖1中質(zhì)粒用限制酶I與限制酶II進(jìn)行完全酶切（各個片段大小不一致），并用凝膠電泳分離酶切后的片段，則電泳結(jié)果應(yīng)為圖2（箭頭為電泳方向）中的A．
②為了篩選符合條件的農(nóng)桿菌，可以在培養(yǎng)基中加入卡那霉素進(jìn)行篩選．則可以在此培養(yǎng)基中生存的農(nóng)桿菌類型為導(dǎo)入未重組的Ti質(zhì)粒農(nóng)桿菌及導(dǎo)入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌．
③農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)基因原理如圖3所示．當(dāng)植物受傷時會產(chǎn)生一種信號分子，該信號會作用于農(nóng)桿菌細(xì)胞表面的受體．試分析接受信號分子后農(nóng)桿菌將T-DNA導(dǎo)入植物細(xì)胞的過程：激活vir區(qū)表達(dá)蛋白裝配成通道復(fù)合體；激活vir區(qū)表達(dá)蛋白以誘導(dǎo)T-DNA區(qū)形成T復(fù)合體通過通道復(fù)合體進(jìn)入植物細(xì)胞后整合進(jìn)入植物基因組DNA．

Answer 1

分析 1、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等．（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體．
3、胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體．用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查．

解答 解：（1）單克隆抗體是由雜交瘤細(xì)胞分泌的；雜交瘤細(xì)胞可由rhEPO免疫過的小鼠B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合而成，在融合過程中至少需要進(jìn)行2次篩選，第一次是篩選雜交瘤細(xì)胞，第二次是篩選能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞．
（2）給良種母牛注射促性腺激素可促使其超數(shù)排卵；精子需要獲能后才能進(jìn)行受精作用；防止多精入卵的兩道屏障依次為 透明帶反應(yīng)、卵黃膜封閉作用．
（3）生態(tài)系統(tǒng)內(nèi)即使某個物種由于某種原因而死亡，也會很快有其他物種占據(jù)它原來的生態(tài)位置，從而避免系統(tǒng)結(jié)構(gòu)或功能失衡，這體現(xiàn)了生態(tài)工程的物種多樣性原理．
（4）①圖1中質(zhì)粒有2個限制酶Ⅰ的切割位點(diǎn)，也有2個限制酶Ⅱ的切割位點(diǎn)，且該質(zhì)粒用限制酶I與限制酶II進(jìn)行完全酶切后產(chǎn)生的各個片段大小不一致，其中有一個片段比較大．因此，該質(zhì)粒被限制酶I與限制酶II進(jìn)行完全酶切后能產(chǎn)生4種大小不同的片段．故選：A．
②由于質(zhì)粒中含有卡那霉素抗性基因，所以在培養(yǎng)基中加入卡那霉素進(jìn)行篩選后，可以在此培養(yǎng)基中生存的農(nóng)桿菌類型為導(dǎo)入未重組的Ti質(zhì)粒農(nóng)桿菌及導(dǎo)入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌．
③根據(jù)圖3，當(dāng)植物受傷時會產(chǎn)生一種信號分子，該信號會作用于農(nóng)桿菌細(xì)胞表面的受體．接受信號分子后農(nóng)桿菌將T-DNA導(dǎo)入植物細(xì)胞的過程為：激活vir區(qū)表達(dá)蛋白裝配成通道復(fù)合體；激活vir區(qū)表達(dá)蛋白以誘導(dǎo)T-DNA區(qū)形成T復(fù)合體通過通道復(fù)合體進(jìn)入植物細(xì)胞后整合進(jìn)入植物基因組DNA．
故答案為：
（1）雜交瘤      2
（2）促性腺激素    獲能     透明帶反應(yīng)、卵黃膜封閉作用
（3）B
（4）①A
②導(dǎo)入未重組的Ti質(zhì)粒農(nóng)桿菌及導(dǎo)入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌
③受體      激活vir區(qū)表達(dá)蛋白裝配成通道復(fù)合體；激活vir區(qū)表達(dá)蛋白以誘導(dǎo)T-DNA區(qū)形成T復(fù)合體通過通道復(fù)合體進(jìn)入植物細(xì)胞后整合進(jìn)入植物基因組DNA

點(diǎn)評 本題結(jié)合圖解，綜合考查基因工程、胚胎工程和生態(tài)工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，能結(jié)合圖中信息答題；識記體外受精的過程及胚胎移植的基本程序；識記生態(tài)工程的基本原理，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．