Question

20．醚苯磺隆是常見的除草劑，在環(huán)境中難以降解．某實驗小組從某農(nóng)藥廠的污泥中富集、篩選出了一株醚苯磺隆降解菌株MB-1，并研究了其降解效率．請回答下列問題：
（1）該實驗小組將取自生產(chǎn)醚苯磺隆農(nóng)藥廠廢水處理池中的廢水按5%的體積分?jǐn)?shù)接入醚苯磺隆含量為200mg/L的MSM液體培養(yǎng)基中，每3d以5%的接種量接入新鮮的醚苯磺隆MSM液體培養(yǎng)基中，這一培養(yǎng)過程稱為選擇培養(yǎng)，其目的是初步篩選醚苯磺隆降解菌，并增大醚苯磺隆降解酶的濃度．
（2）該實驗小組將培養(yǎng)液進(jìn)行梯度稀釋后，將稀釋倍數(shù)為10³、
10⁴和10⁵的培養(yǎng)液分別取0.1mL接種到醚苯磺隆MSM固體培養(yǎng)基上，每個稀釋倍數(shù)涂布三個培養(yǎng)基，最終形成的菌落數(shù)分別為
627、622、658、58、62、63、3、6、7個，則原菌液每升含有的細(xì)菌數(shù)為6.1×10⁹個，該計數(shù)方法得到的測量值一般比實際值偏小，其原因是當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落．若要檢測水體中全部細(xì)菌（無論是否為活菌）的數(shù)目，應(yīng)采用的方法是顯微計數(shù)法．
（3）研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中含有葡萄糖和醚苯磺隆時，MB-1菌株只利用易于攝取的葡萄糖作為能源和碳源，同時誘導(dǎo)產(chǎn)生一種能分解醚苯磺隆的關(guān)鍵酶，該實驗小組研究了不同的葡萄糖濃度對MB-1降解醚苯磺隆能力的影響，實驗結(jié)果如圖所示．
①同時含有葡萄糖和醚苯磺隆的培養(yǎng)基比只含醚苯磺隆的培養(yǎng)基更有利于MB-1菌株的生長繁殖，其原因可
能是MB-1菌株更容易吸收葡萄糖作為碳源和能源，并且醚苯磺隆具有一定的毒害作用；
②當(dāng)葡萄糖濃度較低時，醚苯磺隆降解能力較弱的原因是MB-1菌株的碳源和能源供應(yīng)不足，導(dǎo)致其產(chǎn)生能分解醚苯磺隆的關(guān)鍵酶不足，最有利于醚苯磺隆降解的葡萄糖濃度為200mg/L．

Answer 1

分析 1、兩種純化細(xì)菌的方法的比較：

	優(yōu)點	缺點	適用范圍
平板劃 線分離法	可以觀察菌落特征，對混合菌進(jìn)行分離	不能計數(shù)	適用于好氧菌
稀釋涂布 平板法	可以計數(shù)，可以觀察菌落特征	吸收量較少，較麻煩，平板不干燥效果不好，容易蔓延	適用于厭氧，兼性厭氧

2、檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)，可以看出采用的計數(shù)方法是稀釋涂布平板法進(jìn)行計數(shù)．用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)時，在每一個梯度濃度內(nèi)，至少要涂布3個平板，選擇菌落數(shù)在30～300的進(jìn)行記數(shù)，求其平均值，再通過計算得出土壤中細(xì)菌總數(shù)．

解答 解：（1）根據(jù)實驗的操作步驟可知，實驗小組這一培養(yǎng)過程稱為選擇培養(yǎng)，用于初步篩選醚苯磺隆降解菌，并增大醚苯磺隆降解酶的濃度．
（2）利用稀釋涂布平板法對微生物進(jìn)行計數(shù)時，需要選擇菌落數(shù)在30～300的進(jìn)行記數(shù)，求其平均值，原菌液每升含有的細(xì)菌數(shù)為=（58+62+63）÷3÷0.1×10⁴×10³=6.1×10⁹個；當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，該計數(shù)方法得到的測量值一般比實際值偏小．若要檢測水體中全部細(xì)菌（無論是否為活菌）的數(shù)目，應(yīng)采用顯微計數(shù)法．
（3）①同時含有葡萄糖和醚苯磺隆的培養(yǎng)基比只含醚苯磺隆的培養(yǎng)基更有利于MB-1菌株的生長繁殖，其原因可
能是MB-1菌株更容易吸收葡萄糖作為碳源和能源，并且醚苯磺隆具有一定的毒害作用；
②當(dāng)葡萄糖濃度較低時，醚苯磺隆降解能力較弱，可能是MB-1菌株的碳源和能源供應(yīng)不足，導(dǎo)致其產(chǎn)生能分解醚苯磺隆的關(guān)鍵酶不足；曲線圖中看出，最有利于醚苯磺隆降解的葡萄糖濃度為200mg/L．
故答案為：
（1）選擇培養(yǎng)    初步篩選醚苯磺隆降解菌，并增大醚苯磺隆降解酶的濃度
（2）6.1×10⁹    當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落     顯微計數(shù)法
（3）①M(fèi)B-1菌株更容易吸收葡萄糖作為碳源和能源，并且醚苯磺隆具有一定的毒害作用    ②MB-1菌株的碳源和能源供應(yīng)不足，導(dǎo)致其產(chǎn)生能分解醚苯磺隆的關(guān)鍵酶不足    200mg/L

點評 本題結(jié)合曲線圖，考查微生物的分離和培養(yǎng)的有關(guān)知識，要求考生識記微生物的分離與純化的方法；能夠結(jié)合曲線信息推測（3）的原因，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．