Question

9．根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí)，回答下列問(wèn)題：
（1）限制性內(nèi)切酶切割DNA分子后產(chǎn)生的片段，其末端類(lèi)型有黏性末端和平末端．
（2）按其來(lái)源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類(lèi)，一類(lèi)是從大腸桿菌分離得到的，稱為E•coliDNA連接酶，另一類(lèi)是從T₄噬菌體分離得到的，稱為T(mén)4DNA連接酶，這兩類(lèi)酶的作用是恢復(fù)限制酶切開(kāi)的磷酸二酯鍵．
（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程，稱為轉(zhuǎn)化．若受體細(xì)胞是大腸桿菌，通常用Ca²⁺處理細(xì)胞，使細(xì)胞處于感受態(tài)，易于吸收周?chē)�環(huán)境中的DNA分子．
（4）目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞采用最多的方法是顯微注射法．動(dòng)物基因工程可以提高動(dòng)物的生長(zhǎng)速率是由于外源生長(zhǎng)激素基因在受體動(dòng)物體內(nèi)的表達(dá)：若用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物，科學(xué)家通常將藥物蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起，最終培育的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物進(jìn)入泌乳期后，可以通過(guò)分泌的乳汁生產(chǎn)所需要的藥物，因而稱為乳腺生物反應(yīng)器．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）限制性內(nèi)切酶切割DNA分子后產(chǎn)生兩種類(lèi)型的末端，即黏性末端和平末端．
（2）按其來(lái)源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類(lèi)，一類(lèi)是從大腸桿菌分離得到的，稱為E•coliDNA連接酶，另一類(lèi)是從T₄噬菌體分離得到的，稱為T(mén)4DNA連接酶，這兩類(lèi)酶的作用是恢復(fù)限制酶切開(kāi)的磷酸二酯鍵．
（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程，稱為轉(zhuǎn)化．將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞常用感受態(tài)細(xì)胞法，即用Ca²⁺處理微生物細(xì)胞，使細(xì)胞處于易于吸收周?chē)�環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)．
（4）將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞采用最多的方法是顯微注射法．動(dòng)物基因工程可以提高動(dòng)物的生長(zhǎng)速率是由于外源生長(zhǎng)激素基因在受體動(dòng)物體內(nèi)的表達(dá)．若用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物，科學(xué)家通常將藥物蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起，最終培育的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物進(jìn)入泌乳期后，可以通過(guò)分泌的乳汁生產(chǎn)所需要的藥物，因而稱為乳腺生物反應(yīng)器．
故答案為：
（1）黏性末端    平末端 
（2）大腸桿菌   T₄噬菌體    磷酸二酯鍵
（3）轉(zhuǎn)化   Ca²⁺
（4）顯微注射法    生長(zhǎng)激素   乳腺生物反應(yīng)器

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)問(wèn)題，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．