Question

7．野生酵母菌雖可以利用多種碳源，但對淀粉的利用率較低，因此有科學(xué)家將其他生物的ɑ-淀粉酶基因?qū)�入野生酵母中以獲得工程酵母，回答下列問題：
（1）以酵母菌為受體細胞時，適于用作基因工程運載體的是質(zhì)粒．
（2）野生酵母菌可以將淀粉水解為麥芽糖和葡萄糖，這一過程發(fā)生在酵母菌細胞外（填“細胞外”或“細胞內(nèi)”）．
（3）將ɑ-淀粉酶基因?qū)�入野生酵母后，由于�?dǎo)入成功率不高，可以將這些酵母菌進行梯度稀釋后涂布于含有剛果紅的鑒別（填“選擇”或“鑒別”）培養(yǎng)基上，透明圈大的菌落即為成功導(dǎo)入并表達目的基因的酵母菌菌落．
（4）導(dǎo)入目的基因成功的酵母菌菌種可以置于液體（填“固體”或“液體”）培養(yǎng)基中，在
有氧（填“有氧”或“無氧”）條件下擴大培養(yǎng)．
（5）若要長期保存優(yōu)良的工程酵母菌種，可以將酵母菌液與等量的甘油混勻，置于-20℃的條件下保存．

Answer 1

分析 1、“分子運輸車”--載體
（1）載體具備的條件：①能在受體細胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存．
②具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入．
③具有標記基因，供重組DNA的鑒定和選擇．
（2）最常用的載體是質(zhì)粒，它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨立于細菌擬核DNA之外，并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子．
（3）其它載體：噬菌體的衍生物、動植物病毒
2、培養(yǎng)基按物理性質(zhì)分：

名稱	特征	功能
固體培養(yǎng)基	外觀顯固體狀態(tài)的培養(yǎng)基	主要用于微生物的分離、鑒定
液體培養(yǎng)基	呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基	主要用于工業(yè)生產(chǎn)

解答 解：（1）以酵母菌為受體細胞時，適于用作基因工程運載體的是質(zhì)粒．
（2）野生酵母菌可以將淀粉水解為麥芽糖和葡萄糖，由于淀粉屬于生物大分子，不能進入酵母菌細胞，因此酵母菌會將淀粉酶分泌到細胞外，水解淀粉．
（3）目的基因?qū)�入受體細胞后，需要對目的基因鑒定檢測和鑒定，因此可以將這些酵母菌進行梯度稀釋后涂布于含有剛果紅的鑒別培養(yǎng)基上，透明圈大的菌落說明產(chǎn)生的淀粉酶將淀粉，即該菌落為成功導(dǎo)入并表達目的基因的酵母菌菌落．
（4）導(dǎo)入目的基因成功的酵母菌菌種可以置于液體培養(yǎng)基中，酵母菌在有氧呼吸條件下大量繁殖，即在有氧條件下擴大培養(yǎng)．
（5）若要長期保存優(yōu)良的工程酵母菌種，可以將酵母菌液與等量的甘油混勻，置于-20℃的條件下保存．
故答案為：
（1）質(zhì)粒
（2）麥芽    細胞外
（3）鑒別    透明圈大 
（4）液體    有氧
（5）甘油

點評 本題考查了基因工程和微生物分離和培養(yǎng)的有關(guān)知識，要求考生掌握基因工程的原理、工具以及操作步驟等，掌握培養(yǎng)基的類型以及微生物保存的方法等．