Question

20．動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合、生產(chǎn)單克隆抗體等，回答下列問(wèn)題：
（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)，使用合成培養(yǎng)基培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，通常需要加入血清/血漿等天然成分，細(xì)胞培養(yǎng)所需氣體主要有O₂和CO₂，CO₂的主要作用是維持（培養(yǎng)液的）pH，細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動(dòng)物體溫相近；
（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱(chēng)為細(xì)胞的接觸抑制，此時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是單層（或一層），要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來(lái)，需要用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）酶進(jìn)行處理；
（3）誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合常用的化學(xué)試劑是聚乙二醇（PEG），單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)，靈敏度高，并可大量制備．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)條件：
（1）無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：①消毒、滅菌②添加一定量的抗生素③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物
（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)．
（3）溫度和PH：
（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO₂（維持培養(yǎng)液的PH．）
2、當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到互相接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，出現(xiàn)接觸抑制．此時(shí)需要將出現(xiàn)接觸抑制的細(xì)胞重新使用胰蛋白酶處理．
3、誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有：物理法（離心、振動(dòng)、電激）、化學(xué)法（聚乙二醇）和生物法（滅活的病毒）．

解答 解：（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液為合成培養(yǎng)基，但該培養(yǎng)基中往往要加入一些血清等天然成分．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需氣體主要有O₂和CO₂，CO₂的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要適宜的溫度和PH，其中溫度要與動(dòng)物體溫相近．
（2）在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱(chēng)為細(xì)胞的接觸抑制．此時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是單層（或一層）．要使貼壁細(xì)胞從瓶壁上分離下來(lái)，需要用酶處理，可用的酶是胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）．
（3）誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合常用的化學(xué)試劑是聚乙二醇（PEG）．單克隆抗體的最主要優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)，靈敏度高，并可能大量制備．
故答案為：
（1）血清/血漿（寫(xiě)一個(gè)就給分）  維持（培養(yǎng)液的）pH     動(dòng)物體溫
（2）接觸抑制      單層（或一層）      胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）
（3）聚乙二醇（PEG）   特異性強(qiáng)，靈敏度高

點(diǎn)評(píng) 本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、單克隆抗體的制備的相關(guān)知識(shí)，做該題要求考生熟記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程及條件、單克隆抗體制備的原理、過(guò)程的具體內(nèi)容，難度不大．