Question

世界苦蕎在中國(guó)，中國(guó)苦蕎在涼山．苦蕎富含黃酮類(lèi)化合物等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，在降血糖、降血脂等方面功效顯著．查爾酮合成酶（CHS）是黃酮類(lèi)化合物合成的關(guān)鍵酶，如圖為將修飾后的CHS基因?qū)�入苦蕎，培育高產(chǎn)黃酮苦蕎品系示意圖．

（1）過(guò)程①中能切開(kāi)質(zhì)粒的酶是

 

．它能在質(zhì)粒特定的部位切割的原因是

 

．
（2）圖中常用的是

 

培養(yǎng)基． 接種前，用滅菌后未接種的培養(yǎng)基培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察是否形成菌落，目的是

 

．
（3）過(guò)程②、③分別是

 

和

 

．苦蕎體細(xì)胞能培養(yǎng)成植株的根本原因是

 

．
（4）為探究激素對(duì)于過(guò)程誘導(dǎo)愈傷組織的影響，某研究小組在培養(yǎng)基中加入6-BA和2，4─D，滅
菌后分別接種，在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，統(tǒng)計(jì)愈傷組織的誘導(dǎo)率，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表：

實(shí)驗(yàn)編號(hào)	濃度/mg?L-1		誘導(dǎo)率%	實(shí)驗(yàn)編號(hào)	濃度/mg?L-1		誘導(dǎo)率%	實(shí)驗(yàn)編號(hào)	濃度/mg?L-1		誘導(dǎo)率%
	2，4-D	6-BA	2，4-D		6-BA	2，4-D	6-BA
1	0	0	0	5	0	0.1	6	9	0	0.2	5
2	2		35	6	2		91	10	2		60
3	4		65	7	4		100	11	4		80
4	6		40	8	6		93	12	6		72

該實(shí)驗(yàn)的因變量是

 

，誘導(dǎo)的最佳組合是

 

．
（5）判斷轉(zhuǎn)基因苦蕎培育是否成功，可比較轉(zhuǎn)基因苦蕎與普通苦蕎的

 

含量，也可測(cè)定細(xì)胞中CHS含量．用凝膠色譜法分離CHS時(shí)，CHS最先從色譜柱中洗脫出來(lái)，說(shuō)明CHS相對(duì)分子質(zhì)量較

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),植物培養(yǎng)的條件及過(guò)程

專(zhuān)題：

分析：基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與鑒定．其中構(gòu)建基因表達(dá)載體是基因工程的核心步驟，需要限制酶和DNA連接酶．
植物組織培養(yǎng)技術(shù)包括脫分化和再分化兩個(gè)重要過(guò)程，而決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類(lèi)和比例，特別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過(guò)程中非常重要．

解答： 解：（1）過(guò)程①是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，過(guò)程中能切開(kāi)質(zhì)粒的酶是限制性核酸內(nèi)切酶．它能在質(zhì)粒特定的部位切割的原因是能識(shí)別特定的核苷酸序列并在特定的切點(diǎn)上切割DNA分子，形成粘性末端．
（2）圖中常用的是MS培養(yǎng)基．在接種前，用滅菌后未接種的培養(yǎng)基培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察是否形成菌落，目的是判斷培養(yǎng)基滅菌是否徹底，以防雜菌污染．
（3）過(guò)程②、③分別是脫分化和再分化．苦蕎體細(xì)胞能培養(yǎng)成植株的根本原因是植物細(xì)胞的全能性即細(xì)胞中含有發(fā)育成完整個(gè)體所必需的全部基因．
（4）根據(jù)題意和圖表分析可知：該實(shí)驗(yàn)的因變量是誘導(dǎo)率，誘導(dǎo)的最佳組合是0.1mg?L ^-16-BA和4mg?L^-12，4-D．
（5）判斷轉(zhuǎn)基因苦蕎培育是否成功，可比較轉(zhuǎn)基因苦蕎與普通苦蕎的黃酮類(lèi)化合物含量，也可測(cè)定細(xì)胞中CHS含量．用凝膠色譜法分離CHS時(shí)，CHS最先從色譜柱中洗脫出來(lái)，說(shuō)明CHS相對(duì)分子質(zhì)量較大．
故答案為：
（1）限制性核酸內(nèi)切酶     能識(shí)別特定的核苷酸序列并在特定的切點(diǎn)上切割DNA分子
（2）MS     判斷培養(yǎng)基滅菌是否徹底
（3）脫分化 再分化   植物細(xì)胞的全能性
（4）誘導(dǎo)率    0.1mg?L ^-16-BA和4mg?L^-12，4-D
（5）黃酮類(lèi)化合物 大

點(diǎn)評(píng)：本題綜合考查基因工程和植物細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)的能力．