Question

科學(xué)家將人的生長激素基因與某種細(xì)菌(不含抗生素抗性基因)的DNA分子進行重組,并成功地在該細(xì)菌中得以表達(如下圖)。請據(jù)圖分析回答:

(1)過程①所示獲取目的基因的方法是 。

(2)細(xì)菌是理想的受體細(xì)胞,這是因為它 

 

。

(3)質(zhì)粒A與目的基因結(jié)合時,首先需要用 酶將質(zhì)粒切開“缺口”,然后用 酶將質(zhì)粒與目的基因“縫合”起來。

(4)若將細(xì)菌B先接種在含有 的培養(yǎng)基上能生長,說明該細(xì)菌中已經(jīng)導(dǎo)入外源質(zhì)粒,但不能說明外源質(zhì)粒是否成功插入目的基因;若將細(xì)菌B再重新接種在含有 的培養(yǎng)基上不能生長,則說明細(xì)菌B中已經(jīng)導(dǎo)入了插入目的基因的重組質(zhì)粒。

(5)檢測工程菌中的生長激素基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA和是否翻譯出生長激素,可采用的技術(shù)分別是 、 。

 

Answer 1

(1)反轉(zhuǎn)錄法(逆轉(zhuǎn)錄法)

(2)繁殖快、單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對較少

(3)限制性內(nèi)切酶 DNA連接

(4)氨芐青霉素 四環(huán)素

(5)分子雜交 抗原—抗體雜交

【解析】(1)圖中過程①是以RNA為模板,通過反轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因。(2)細(xì)菌具有繁殖快、單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對較少等優(yōu)點,因此是基因工程中的理想的受體細(xì)胞。(3)構(gòu)建基因表達載體時,需先用限制酶分別切割目的基因和載體,再用DNA連接酶將兩者連接起來。(4)質(zhì)粒A和重組質(zhì)粒中都有完整的抗氨芐青霉素基因,因此細(xì)菌有氨芐青霉素抗性說明該細(xì)菌中已經(jīng)導(dǎo)入外源質(zhì)粒,但不能說明外源質(zhì)粒是否成功插入目的基因;重組質(zhì)粒中抗四環(huán)素基因內(nèi)插入了目的基因,不能表達,因此細(xì)菌對四環(huán)素?zé)o抗性則說明細(xì)菌B中已經(jīng)導(dǎo)入了插入目的基因的重組質(zhì)粒。(5)檢測mRNA和生長激素(蛋白質(zhì))的技術(shù)分別是分子雜交和抗原-抗體雜交。