Question

2．如圖表示轉(zhuǎn)基因煙草的培育過程．請據(jù)圖回答：
（1）圖示過程中將外源基因?qū)�入受體細胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．
（2）基因工程的核心步驟是基因表達載體的構建，該過程用到的工具酶有限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）和DNA連接酶．
（3）圖示過程中用到的植物細胞工程技術是植物組織培養(yǎng)，這一技術的原理是離體的植物細胞具有全能性．
（4）最后通過抗原-抗體雜交技術檢測外源基因在煙草體內(nèi)是否翻譯出了對應的蛋白質(zhì)．

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）圖示過程將外源基因?qū)�入受體細胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．
（2）基因工程的核心步驟是基因表達載體的構建，該過程中首先要用限制酶切割含有目的基因的運載體，其次需要用DNA連接酶將目的基因與運載體連接形成重組DNA．
（3）將轉(zhuǎn)基因植物細胞培育成轉(zhuǎn)基因植株還需要采用植物組織培養(yǎng)技術，其原理是植物細胞具有全能性．
（4）檢測目的基因是否翻譯形成蛋白質(zhì)需要采用抗原-抗體雜交技術．
故答案為：
（1）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
（2）基因表達載體的構建       限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）    DNA連接酶
（3）植物組織培養(yǎng)    具有全能性 
（4）抗原-抗體雜交

點評 本題結合圖解，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的概念、原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能結合所學的知識準確答題．