Question

【題目】蘇云金桿菌(Bt)能產(chǎn)生具有殺蟲作用的毒素蛋白。如圖l是4種限制酶及其所識別的序列與酶切位點，圖2是轉(zhuǎn)Bt毒素蛋白基因棉花的培育過程示意圖，圖2中a和b分別表示抗卡那霉素基因和抗四環(huán)素基因(棉花細胞中不含抗卡那霉素基因和抗四環(huán)素基因)，據(jù)圖回答下列問題：

（1）利用PCR技術(shù)擴增目的基因的原理是 ， 前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成 ， 用此方法得到的所需目的基因至少要復(fù)制次。
（2）基因工程的核心步驟是 ， 假設(shè)圖2中質(zhì)粒原來的BamH I識別位點的堿基序列變?yōu)榱肆硪环N限制酶Bcl I識別位點的堿基序列，現(xiàn)用Bcl I和Hind Ⅲ切割質(zhì)粒，則目的基因右側(cè)還能選擇BamH I進行切割，并獲得所需重組質(zhì)粒嗎? ， 請說明理由。
（3）抗蟲基因能在棉花細胞中表達，是因為不同生物共用 。導(dǎo)入重組質(zhì)粒的棉花細胞能在含(填抗生素種類)的培養(yǎng)基上生長。

Answer 1

【答案】
（1）DNA雙鏈復(fù)制；引物；3
（2）基因表達載體的構(gòu)建；可以；切出的粘性末端相同
（3）一套密碼子；四環(huán)素
【解析】（1）利用PCR技術(shù)擴增目的基因的原理是DNA雙鏈復(fù)制；利用PCR技術(shù)擴增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物；根據(jù)DNA分子具有半保留復(fù)制的特點，可推知用此方法得到的所需目的基因至少要復(fù)制3次。（2）基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟；據(jù)圖1可知，限制酶Bcl I和限制酶BamH I切出的黏性末端相同，所以目的基因右側(cè)仍然還能選擇BamH I進行切割，并獲得所需重組質(zhì)粒。（3）抗蟲基因能在棉花細胞中表達，是因為不同生物共用一套密碼子；據(jù)圖2可知，Ti質(zhì)粒和含目的基因的DNA均需用限制酶BamH I和Hind Ⅲ切割，這樣會導(dǎo)致重組質(zhì)粒上缺失a部分(抗卡那霉素基因)，而只含b部分（抗四環(huán)素基因），因此，導(dǎo)入重組質(zhì)粒的棉花細胞能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長。
【考點精析】本題主要考查了基因工程的應(yīng)用的相關(guān)知識點，需要掌握植物基因工程：抗蟲、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物，利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)；動物基因工程：提高動物生長速度、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)藥物；基因治療：把正常的外源基因?qū)�入病人體內(nèi)，使該基因表達產(chǎn)物發(fā)揮作用才能正確解答此題．